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铜虫 (小有名气)

[交流] 关于含卡那抗性载体的菌株生长缓慢问题

我将含有pET28a重组质粒的BL21菌株的甘油菌划线到平板活化后，挑单菌至5ml的LB（加50ug/ml卡那）过夜培养。可是培养了14h，菌液还是很稀很稀；看起来OD600不会超过0.4.

这是怎么回事啊？

请大家指教。。。。。。

1楼2009-09-26 09:17:04

木虫 (著名写手)

我們是糖甜到憂傷

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
350784478(金币+1,VIP+0):感谢参与 9-26 10:03

想问下你活化用的平板放卡那了吗？
不知道你的表达菌存放多久了，保存重组质粒的菌株最好用DH5α，用表达菌株存重组质粒，时间久了，会导致质粒降解，放卡那当然就不长了。
建议用重组质粒再转化BL21.

Thank-you，so-blue.

3楼2009-09-26 09:45:14

木虫 (著名写手)

我們是糖甜到憂傷

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

引用回帖:

Originally posted by melodyxin at 2009-9-26 10:00:
另外，如果直接从甘油管接种20ul到5ml的LB（含卡那）中，长势就还好。相当奇怪。

是不是挑菌的时候没挑进去？液体接种当然就保险些。

Thank-you，so-blue.

6楼2009-09-26 10:23:56

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