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melodyxin

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[交流] 关于含卡那抗性载体的菌株生长缓慢问题

我将含有pET28a重组质粒的BL21菌株的甘油菌划线到平板活化后，挑单菌至5ml的LB（加50ug/ml卡那）过夜培养。可是培养了14h，菌液还是很稀很稀；看起来OD600不会超过0.4.

这是怎么回事啊？

请大家指教。。。。。。

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1楼 2009-09-26 09:17:04

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melodyxin

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很急，求教！！！

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2楼2009-09-26 09:20:54

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susizheng

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想问下你活化用的平板放卡那了吗？
不知道你的表达菌存放多久了，保存重组质粒的菌株最好用DH5α，用表达菌株存重组质粒，时间久了，会导致质粒降解，放卡那当然就不长了。
建议用重组质粒再转化BL21.

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Thank-you，so-blue.

3楼2009-09-26 09:45:14

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melodyxin

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引用回帖:

Originally posted by susizheng at 2009-9-26 09:45:
想问下你活化用的平板放卡那了吗？
不知道你的表达菌存放多久了，保存重组质粒的菌株最好用DH5α，用表达菌株存重组质粒，时间久了，会导致质粒降解，放卡那当然就不长了。
建议用重组质粒再转化BL21.

啊？重新转化啊？
我放了一个半月，平板是放了卡那的。

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4楼2009-09-26 09:57:40

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