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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 【求助】硅胶柱的装柱问题
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luoye2008

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】硅胶柱的装柱问题 已有5人参与

我要装个长60cm，直径是2.5cm的玻璃硅胶柱，不知道要称多少硅胶，加多少流动相溶这些硅胶 ，这些都有固定的比例吗？怎么计算柱的保留体积啊 刚开始学 好多都不懂 希望回答的详细些 谢谢了！

[ Last edited by louyiceng on 2009-10-12 at 13:21 ]
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努力奋斗！
1楼 2009-09-25 13:08:50
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

药贩要饭

铁虫 (小有名气)
★ ★
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karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢！ 10-14 00:54
对于湿法上柱，我有个小窍门，你可以看看是否可行。先把你的柱子装满水。然后将水倒入量筒，就知道你的珠子体积大概是多少了，比如你的柱子能装下100ml的水，那么你湿法装柱时，就用100ml的锥形瓶装硅胶，大约加硅胶到80ml左右。然后用洗脱液把硅胶拌匀，超声一下，出下气泡。然后讲拌好后的硅胶倒入柱子，接下来的方法。如上几个虫友所说。
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14楼2009-10-12 13:10:55
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hzxyzh

新虫 (初入文坛)
★ ★
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karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢您的回复！ 10-15 00:58
如果你的化合物杂质很少也很容易分离可以湿法装柱，不然还是建议干法装柱（可以用真空泵抽，柱效很不错的）。
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15楼2009-10-12 13:36:53
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joding

铁虫 (初入文坛)
★ ★
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karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供！ 10-15 00:57
本人一直用湿法装柱，至于硅胶你完全可以先倒入柱子到预定高度再多加一些硅胶，之后倒入烧杯用你第一个洗脱溶剂混匀，然后装柱子（没有漏斗你完全可以用一张干净的纸代替漏斗，比漏斗好用），装柱过程中如果溶剂溢出此时减压将多余的溶剂流出。烧杯中溶剂挥发硅胶流动性差，此时放心加溶剂继续混匀，多次加入有气泡可以用玻璃棒搅拌或用力振摇。装好柱后静置5-12小时都行，最好过夜，当然要保证液面不能干，之后放心上样吧
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细节才是完美！
19楼2009-10-14 23:00:03
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小妖歪歪

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
装多少凭感觉，装多高看心情。干法又一次我用甲醇都没冲下来就那么废了，干法跑的齐
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26楼2014-01-01 12:43:22
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普通回帖

狼狼晴空

木虫 (著名写手)
这个东西其实是凭感觉的！没有具体的计算方法！
装到5分之2点几就行！努力吧！
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2楼2009-09-25 14:02:56
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xf4671566

铁杆木虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
chzhbin(金币+2,VIP+0):谢谢认真回帖交流！ 9-25 20:29
luoye2008(金币+2,VIP+0): 9-27 18:14
你要装硅胶柱，不知道是湿法装柱还是干法装柱，
湿法装柱：把你的硅胶放到洗脱剂中，浸泡，然后先把你的洗脱剂先倒入柱子中，然后把你的硅胶和洗脱剂在一起倒入柱子中，在此过程中，洗脱剂的液面要高于硅胶。
干法装柱：把的硅胶直接装入柱子中，在此过程中要不断的垫柱子，使硅胶紧密的装好！然后再干法上样，再用洗脱液洗脱就可以了！

计算保留体积：首先你要把硅胶在你的洗脱剂中浸泡一段时间，然后再把已经浸透的硅胶放入一定体积的洗脱液中，再装柱子时，就用这些洗脱液，装好柱子后（洗脱液液面略高于硅胶），再量量剩余的洗脱液的体积。差值就是柱子的保留体积。

仅是自己的试验心得，希望能给你点帮助。。。
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自强不息，努力奋斗！
3楼2009-09-25 14:24:52
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luoye2008

金虫 (小有名气)
★ ★
chzhbin(金币+2,VIP+0):谢谢认真回帖交流！ 9-25 20:29
是这样计算 保留体积吗  硅胶一定量加一定量流动相搅拌 在装柱前 往柱中装一定体积的流动相 再把溶好的硅胶倒入柱子中 等液面放到硅胶面时 在称量流下来的流动相的体积 就是保留体积了 是这样吗
可是溶解的硅胶的流动相不能完全加入到柱子中啊 柱子就被填满了 等它下去的时候 就不能在加硅胶了 会分层的 到底要称多少硅胶再加多少流动相 再往柱子中填多少流动相 才刚刚好啊  真难啊  谁知道啊 求助求助
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努力奋斗！
4楼2009-09-25 15:20:33
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buwudaoli

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
karl2100(金币+1,VIP+0):3Q 9-26 00:37
luoye2008(金币+2,VIP+0): 9-27 18:13
这个不需要很精确吧？而且柱子装长装短1cm对你的分离结果都没啥影响
我们实验室基本都是干法装柱，就把硅胶往柱子里倒，没人还事先去称重，因为凭经验，柱子被掂实后（或者是在底部抽真空），硅胶面会下降一寸左右，所以如果我想装一个高20cm的柱子，就会倒硅胶到23cm高。
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5楼2009-09-25 21:15:28
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Superzyl43

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢！ 9-26 00:37
luoye2008(金币+2,VIP+0): 9-27 18:13
一般装的柱子所用的硅胶量跟你的样品量有关吧，不根据样品量装柱会造成浪费硅胶（柱子过高也浪费时间）或者柱子过低造成分离效果不好。一般样品量比硅胶量在1：30左右。
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6楼2009-09-25 22:07:33
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小叶子5501

金虫 (小有名气)
★ ★
luoye2008(金币+2,VIP+0): 9-27 18:13
吸附剂的用量一般采用样品量的10～30倍，根据披分离化合物的性质而定。一般来说在能达到分离的前提下尽量减少吸附剂剂用量，因吸附剂量大，死吸附的样品量大，使样品损失量大。
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7楼2009-09-26 09:24:05
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ysh2225

木虫 (著名写手)
★ ★
luoye2008(金币+2,VIP+0): 9-27 18:13
湿法装柱的话可以先装一部分，后边看不够了再加些也可以，之后压实，有第一次后面就好办了，就有经验了
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8楼2009-09-26 21:59:08
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wcs0313

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
一般分为干法装柱和湿法装柱，我们实验室一般用湿法，觉得挺方便的。干法装柱有一个不足就是容易起泡
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9楼2009-10-06 23:55:01
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lazierboy

专家顾问 (正式写手)
★
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干法装柱分离效果会不错 ……
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10楼2009-10-07 00:09:05
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