| 查看: 1831 | 回复: 23 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
[交流]
大肠杆菌表达蛋白心得体会
|
|||
|
各位大侠： 有做细菌表达的朋友吗？如果有，交流一下心得体会。先说明了，我是新小木虫，想求助点文献，可是啊，没有金币啊，也不知道发这个帖子能否为我换回点金币，也请大侠们指点一二啊，怎样获得金币！！！ 言归正传，前几次做大肠杆菌表达，一个偶然，发现这么一个现象：将表达菌涂布平板后，在冰箱（4℃）放置10天后，挑克隆，接种，然后诱导，同样表达出了目的蛋白，而且表达量感觉没有下降。 大家都知道，我们原来的概念是，转化-涂布平板-挑单克隆-接种-诱导表达是一条龙下来的，原来老师给我讲的是，只能从新涂布的平板上挑克隆，否则表达量很低，或者表达失败。 这个经验也请大家试试。它最大的好处是减少了工作量，做一次转化，可以做多次表达，节省时间。 [ Last edited by amisking on 2009-11-28 at 12:05 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
297，工科调剂?河南农业大学本科
已经有11人回复
-
22专硕求调剂
已经有11人回复
-
284求调剂
已经有20人回复
-
291求调剂
已经有7人回复
-
296求调剂
已经有5人回复
-
一志愿沪9，生物学326求调剂
已经有4人回复
-
生物学调剂
已经有8人回复
-
22408 312求调剂
已经有19人回复
-
26年电池方向博士申请
已经有4人回复
-
0854调剂
已经有16人回复
qingshaojun0823
荣誉版主 (文坛精英)
LOVE
- 应助: 0 (幼儿园)
- 贵宾: 7.568
- 金币: 7478.8
- 散金: 11616
- 红花: 36
- 沙发: 7
- 帖子: 10763
- 在线: 334.8小时
- 虫号: 443273
- 注册: 2007-10-27
- 专业: 催化化学
- 管辖: 论文投稿交流
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
zhuimengren639(金币+1,VIP+0):鼓励一下，很贴心哦！ 9-22 23:09
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
zhuimengren639(金币+1,VIP+0):鼓励一下，很贴心哦！ 9-22 23:09
|
对于新虫，可以去新手上路版块 http://muchong.com/bbs/forumdisplay.php?fid=215 那里有关于介绍如何赚取金币! |
3楼2009-09-22 18:00:17
HarveyWang
捐助贵宾 (知名作家)
海外行者
- BioEPI: 14
- 应助: 80 (初中生)
- 金币: 2277.2
- 散金: 24
- 红花: 65
- 帖子: 6880
- 在线: 946小时
- 虫号: 528557
- 注册: 2008-03-19
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+4,VIP+0): 12-2 12:35
amisking(金币+3,VIP+0): 12-6 12:02
amisking(金币+4,VIP+0): 12-2 12:35
amisking(金币+3,VIP+0): 12-6 12:02
|
我的平板在冰箱放置 25天还照样表达很高！ 关键是你的平板是验证过的。 所谓验证，就是每逢平板长好以后，随便挑10个做摇瓶，诱导表达， 都表达可以，这个平板才会在冰箱保藏， 并进一步用来做其他的实验。 此后再也不用担心种子问题了！ 这样优秀的平板也用来挑菌落保存菌株，甘油管-20℃， 一年内都不用再担心种子问题了！ 如果存在没有表达的菌落，你的平板就不能再用！！！ 就要继续筛菌，直到平板上的菌落随机调10个，都表达蛋白为止。  [ Last edited by HarveyWang on 2009-10-2 at 08:27 ] |
10楼2009-10-02 08:24:29
2楼2009-09-22 15:47:23
朋友介绍来到这里，觉得很有意思的。 4楼2009-09-23 09:08:21
5楼2009-09-24 11:17:01
fxj1986
木虫 (正式写手)
从小就是好人
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 4275.8
- 散金: 928
- 红花: 7
- 帖子: 948
- 在线: 264.8小时
- 虫号: 721183
- 注册: 2009-03-12
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
6楼2009-09-24 11:41:45
7楼2009-09-24 20:10:23
chinosaur
木虫 (正式写手)
求购IQ卡
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 3126.4
- 散金: 50
- 红花: 3
- 帖子: 717
- 在线: 142.4小时
- 虫号: 257498
- 注册: 2006-06-04
- 性别: GG
- 专业: 计算机软件
8楼2009-10-02 00:50:13
HarveyWang
捐助贵宾 (知名作家)
海外行者
- BioEPI: 14
- 应助: 80 (初中生)
- 金币: 2277.2
- 散金: 24
- 红花: 65
- 帖子: 6880
- 在线: 946小时
- 虫号: 528557
- 注册: 2008-03-19
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
|
如何赚金币，在这里！ http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=1568824 [ Last edited by HarveyWang on 2009-10-2 at 08:26 ] |
9楼2009-10-02 08:18:19
