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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 大肠杆菌表达蛋白心得体会
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two

金虫 (正式写手)
★ ★
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amisking(金币+1,VIP+0): 12-2 12:35
肯定是适宜温度菌体生长良好,表达蛋白也多,至于你发现的现象很好,应该比较一下,在活性低的菌中也表达不错.支持研究.
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努力快乐着,但生活本不如意
21楼2009-12-01 09:20:03
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lboo7

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
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amisking(金币+2,VIP+0): 12-2 13:11
引用回帖:
Originally posted by fallstone at 2009-9-24 20:10:
当然是指平板经过培养，长出克隆后，保存在4℃冰箱！

这个方法我也试过,确实很有效,不过在每次摇完菌后,最好重新保菌,这样可以使你的蛋白保持很高的活性,没必要在OD为0.6时保菌,完全可以先活化,再转接.最后表达就行了.
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22楼2009-12-02 10:40:29
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zier1011

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★
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amisking(金币+4,VIP+0): 12-6 12:02
本人不理解，你放4度10天，比你不放10天的平板，除了菌活力会有所下降外，还有什么别的用处？
重组菌的成功与否，在菌落长出来的时候，就一定确定了，表达量的多少，只跟你的重组菌和诱导条件有关，你放置的时间不能改变你的重组菌所携带质粒的基因序列，所以在诱导条件不变的情况下，不能改变蛋白的表达能力！
只能降低菌种活力，而且随着时间的延长，菌种活力越来越低，最后死掉！
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花还香香的
23楼2009-12-04 11:15:37
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1949stone

荣誉版主 (知名作家)

海纳百川
★
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我见过大量表达包涵体的 蛋白质变性又复性
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海纳百川止于至善
24楼2009-12-05 20:32:01
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