24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1061  |  回复: 8
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

solemon23

木虫 (著名写手)

五星上将James下士

[交流] 提真菌RNA老是降解怎么回事?

准备做DDRT-PCR,用Trizol法提取RNA,完整性总是不好,找不出原因,请教各位大侠,指点一二。
提取真菌RNA,OD值如下:
260/280
1.97
1.98
1.87

260/230
1.53
1.18
1.03
电泳图片如下:
回复此楼

» 猜你喜欢

人似秋鸿来有信,事如春梦了无痕。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zuodongyun

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★
solemon23(金币+2,VIP+0):xiexie 1-3 23:23
降解得很厉害,首先要确定提取RNA的仪器和试剂没有RNAase污染,研钵研棒180度烘3-4h,其他要用的东西高压灭菌3次,试剂也要用RNAasefree water 配制;其次,在研磨的时候速度要快,防止冻融后细胞的内源RNAase降解,最好在无菌工作台内进行操作
5楼2009-09-22 18:00:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

imwjc

金虫 (小有名气)


solemon23(金币+1,VIP+0):xiexie 1-3 23:22
是完全按照Trizol说明书做的吗?有没有在匀浆或研磨破壁后离心呀?
2楼2009-09-22 12:05:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cuizy2007

至尊木虫 (著名写手)


solemon23(金币+1,VIP+0):xiexie 1-3 23:22
人身体、唾液中有很多RNA酶,是不是提取的环境不够清洁,或者说话了什么的……
3楼2009-09-22 12:55:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bioxixi

木虫 (著名写手)

★ ★
solemon23(金币+2,VIP+0):xiexie 1-3 23:22
偶有段时间也这样,当然我不是提真菌的,后来提好了也没找出是什么原因。。。
记得当时的转折点是加异丙醇以后,轻柔的转动,不过后来偶剧烈震荡也没有什么问题了。。。。
建议器具处理、灭菌要彻底,操作环境提前碰酒精,有条件可以用紫外照照,准备工作做好,放心大胆提就是了,你越勇敢RNase越脆弱。。。
4楼2009-09-22 13:56:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿中科大材料与化工,353分还有调剂学校吗 +7 否极泰来2026 2026-04-15 9/450 2026-04-16 13:40 by liumingli7817
[考研] 300求调剂 +10 橙a777 2026-04-15 10/500 2026-04-16 12:50 by maoqinghuijz
[考研] 289 分105500药学专硕求调剂(找B区学校) +4 白云123456789 2026-04-13 4/200 2026-04-16 00:18 by 粉沁若尘
[考研] 求调剂 +11 小聂爱学习 2026-04-11 15/750 2026-04-15 21:57 by noqvsozv
[考研] 一志愿A区211,22408 321求调剂 +6 随心所欲☆ 2026-04-15 7/350 2026-04-15 21:45 by lbsjt
[考研] 310求调剂 +16 666真好 2026-04-11 18/900 2026-04-15 13:28 by 黑科技矿业
[考研] 求调剂 +16 雪逢冬 2026-04-10 16/800 2026-04-14 14:27 by 逆水乘风
[考研] 295分求调剂 +13 ?要上岸? 2026-04-10 13/650 2026-04-12 15:37 by laoshidan
[考研] 339求调剂 +8 hanwudada 2026-04-11 9/450 2026-04-12 15:36 by laoshidan
[考研] 化工调剂求导师收留!一志愿失利,踏实肯干,有植物提取科研经历 +20 yzyzx 2026-04-09 21/1050 2026-04-12 00:12 by 小小小小啦啦啦
[考研] 求调剂 +6 archer.. 2026-04-09 8/400 2026-04-11 10:55 by zhq0425
[考研] 085410-273求调剂 +6 X1999 2026-04-10 6/300 2026-04-11 10:32 by Delta2012
[考研] 机械专硕270求调剂,接受跨专业 +12 老师看看我吧aba 2026-04-09 14/700 2026-04-11 10:21 by laoshidan
[考研] 22408 352分求调剂0854类 +4 努力的夏末 2026-04-09 4/200 2026-04-11 09:57 by zhq0425
[考研] 282,求调剂 +12 jggshjkkm 2026-04-09 14/700 2026-04-11 09:39 by 猪会飞
[考研] 一志愿北理工298英一数二已上岸,感谢各位老师 +14 Reframe 2026-04-10 16/800 2026-04-10 23:07 by caotw2020
[考研] 机械专368 有去处吗 +4 种大树 2026-04-10 4/200 2026-04-10 15:31 by jiajinhpu
[考研] 282,电气工程专业,求调剂,不挑专业 +9 jggshjkkm 2026-04-10 9/450 2026-04-10 14:55 by 逆水乘风
[考研] 求调剂 +11 翩翩一书生 2026-04-09 13/650 2026-04-10 10:27 by liuhuiying09
[考研] 337求调剂 +4 Gky09300550, 2026-04-09 4/200 2026-04-09 17:18 by 帕尔马拉特
信息提示
请填处理意见