24小时热门版块排行榜    

查看: 1029  |  回复: 8
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

solemon23

木虫 (著名写手)

五星上将James下士

[交流] 提真菌RNA老是降解怎么回事?

准备做DDRT-PCR,用Trizol法提取RNA,完整性总是不好,找不出原因,请教各位大侠,指点一二。
提取真菌RNA,OD值如下:
260/280
1.97
1.98
1.87

260/230
1.53
1.18
1.03
电泳图片如下:
回复此楼

» 猜你喜欢

人似秋鸿来有信,事如春梦了无痕。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cuizy2007

至尊木虫 (著名写手)


solemon23(金币+1,VIP+0):xiexie 1-3 23:22
人身体、唾液中有很多RNA酶,是不是提取的环境不够清洁,或者说话了什么的……
3楼2009-09-22 12:55:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

imwjc

金虫 (小有名气)


solemon23(金币+1,VIP+0):xiexie 1-3 23:22
是完全按照Trizol说明书做的吗?有没有在匀浆或研磨破壁后离心呀?
2楼2009-09-22 12:05:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bioxixi

木虫 (著名写手)

★ ★
solemon23(金币+2,VIP+0):xiexie 1-3 23:22
偶有段时间也这样,当然我不是提真菌的,后来提好了也没找出是什么原因。。。
记得当时的转折点是加异丙醇以后,轻柔的转动,不过后来偶剧烈震荡也没有什么问题了。。。。
建议器具处理、灭菌要彻底,操作环境提前碰酒精,有条件可以用紫外照照,准备工作做好,放心大胆提就是了,你越勇敢RNase越脆弱。。。
4楼2009-09-22 13:56:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zuodongyun

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★
solemon23(金币+2,VIP+0):xiexie 1-3 23:23
降解得很厉害,首先要确定提取RNA的仪器和试剂没有RNAase污染,研钵研棒180度烘3-4h,其他要用的东西高压灭菌3次,试剂也要用RNAasefree water 配制;其次,在研磨的时候速度要快,防止冻融后细胞的内源RNAase降解,最好在无菌工作台内进行操作
5楼2009-09-22 18:00:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿北京化工大学 070300 学硕 336分 求调剂 +7 vv迷 2026-03-22 7/350 2026-03-23 23:44 by Txy@872106
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +8 tcxiaoxx 2026-03-20 9/450 2026-03-23 12:16 by tcxiaoxx
[考研] 291求调剂 +5 孅華 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:20 by haoshis
[考研] 293求调剂 +3 涛涛Wjt 2026-03-22 5/250 2026-03-22 22:21 by jiangpengfei
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-20 3/150 2026-03-22 16:00 by ColorlessPI
[考研] 298求调剂一志愿211 +3 上岸6666@ 2026-03-20 3/150 2026-03-22 15:50 by ColorlessPI
[考研] 一志愿北京化工大学070300 学硕336求调剂 +5 vv迷 2026-03-21 8/400 2026-03-22 14:20 by ColorlessPI
[考研] 085600材料与化工306 +4 z1z2z3879 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:44 by ms629
[考研] 286分人工智能专业请求调剂愿意跨考! +4 lemonzzn 2026-03-17 8/400 2026-03-21 22:49 by lemonzzn
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +5 holy J 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:42 by Catalysis25
[考研] 280求调剂 +11 咕噜晓晓 2026-03-18 12/600 2026-03-21 22:40 by ACS Nano——
[考研] 一志愿东华大学控制学硕320求调剂 +3 Grand777 2026-03-21 3/150 2026-03-21 19:23 by 简之-
[考研] 一志愿深大,0703化学,总分302,求调剂 +4 七月-七七 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:20 by 学员8dgXkO
[考研] 297求调剂 +11 戏精丹丹丹 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:47 by ColorlessPI
[考研] 材料学学硕080502 337求调剂-一志愿华中科技大学 +4 顺顺顺mr 2026-03-18 5/250 2026-03-21 10:22 by luoyongfeng
[考研] 一志愿华南师大 070300(化学)304分求调剂 +3 0703武芊慧雪304 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:48 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:32 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中海洋材料工程专硕330分求调剂 +8 小材化本科 2026-03-18 8/400 2026-03-20 23:16 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
信息提示
请填处理意见