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xuxb_4156

新虫 (初入文坛)

[交流] 求助!!关于平末端连接问题

最近在做载体构建,有一个5k左右的片段要连接到一个12k左右的载体骨架上,两端都是平末端,始终连不上,不知道连接体系需要怎样的优化,连接酶要多,但是一个10ul的体系中,到底要加多少酶???以及目的片段和载体各是多少才合适????没做过,身边的人也没有经验,做的非常辛苦啊~~~
请各位高手指点指点啊!!!谢谢
ps: 载体已经去磷酸化

[ Last edited by xuxb_4156 on 2009-9-18 at 21:17 ]
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xuxb_4156

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by wangxiaoli8216 at 2009-9-18 21:13:
载体去磷酸化

已经去磷酸化了,连了几次都只有几个斑,而且不是重组子
5楼2009-09-18 22:23:37
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