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lina陶

铜虫 (小有名气)

[交流] 发酵染菌问题已有4人参与

之前发酵出现问题,大概率是空气滤芯问题,换了之后就没事了,这次换了两次滤芯都还是染菌。但奇怪的是,有时好有时坏(坏的比较多),到底是哪问题,种子液镜检过也培养过没问题。现打算空培试下,B罐3000L那么大,请问要怎么空培,我做的是屎肠球菌

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高高高

金虫 (小有名气)

2楼2023-02-10 15:14:53
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lina陶

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 高高高 at 2023-02-10 15:14:53
屎肠?

是的

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3楼2023-02-11 07:50:45
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djg0810

木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★
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小冀-: 金币+3, 鼓励回帖交流 2023-02-16 10:52:59
染的球菌还是杆菌?或者就是噬菌体?发酵液平板划线找出杂菌的菌落镜检下。
3m3的罐子染菌还是比较好查的。设备问题阀门是否内漏、冷却管是否穿孔、设备清洁是否到位、物料是否结块、灭菌操作是规范。空培能验证设备是不是有问题,0.3%——1%葡萄糖,少加点硫酸铵、磷酸二氢钾,有条件加点酵母膏,调下PH。
4楼2023-02-15 15:31:57
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lina陶

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by djg0810 at 2023-02-15 15:31:57
染的球菌还是杆菌?或者就是噬菌体?发酵液平板划线找出杂菌的菌落镜检下。
3m3的罐子染菌还是比较好查的。设备问题阀门是否内漏、冷却管是否穿孔、设备清洁是否到位、物料是否结块、灭菌操作是规范。空培能验证设 ...

阀门没漏,消毒的同事也说没问题。我也验证过不加菌种是没问题的,就是从种子罐移到发酵罐时就出问题了,但摇床培养出来的不是我们经常染的菌,不是每批都坏,有好有坏,没有专业的人指点头都大了

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5楼2023-02-22 15:01:18
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djg0810

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by lina陶 at 2023-02-22 15:01:18
阀门没漏,消毒的同事也说没问题。我也验证过不加菌种是没问题的,就是从种子罐移到发酵罐时就出问题了,但摇床培养出来的不是我们经常染的菌,不是每批都坏,有好有坏,没有专业的人指点头都大了
...

我是做大肠发酵大生产的,360m3罐。这边是这样监测无菌的
1、种子罐消后接种前培养基取肉汤培养。
2、种子罐移种前取种子液涂平板划线。
3、发酵罐接种前培养基取肉汤培养。
4、发酵过程间隔12h取发酵液涂平板划线。
5、补料消后也是要取肉汤培养的。
必须先找到染菌的时间点缩小排查范围。
比如你种子罐移种前的平板划线是没问题的,发酵罐消后接前的肉汤也是没问题的。然后刚移进去几个小时取样平板就有杂菌了,那大概率就移种过程有问题。
6楼2023-03-01 15:16:35
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小C:O

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
移种过程中注意种子罐保死压,不能空压,尾气关死,大罐尽量低压,尾气最好加个过滤器。有可能就是发酵罐尾气倒流造成的污染,现在发酵系统很多人忽视尾气这一块,多套发酵罐都是串联共同一个尾气管道

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7楼2023-03-08 19:24:36
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419400

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
从以上帖子看出,可能是你移种操作和移种管道出现问题,移种分配站需要检查及消毒彻底,其次移种管道和阀门也需要检查,第三移种管道消毒后,你靠什么冷却移种管道,第四检查移种操作是否有问题
8楼2023-05-15 10:22:11
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