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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 发酵染菌问题
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lina陶

铜虫 (小有名气)

[交流] 发酵染菌问题已有4人参与

之前发酵出现问题，大概率是空气滤芯问题，换了之后就没事了，这次换了两次滤芯都还是染菌。但奇怪的是，有时好有时坏（坏的比较多），到底是哪问题，种子液镜检过也培养过没问题。现打算空培试下，B罐3000L那么大，请问要怎么空培，我做的是屎肠球菌

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1楼2023-02-10 11:19:51
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djg0810

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小冀-: 金币+3, 鼓励回帖交流 2023-02-16 10:52:59
染的球菌还是杆菌？或者就是噬菌体？发酵液平板划线找出杂菌的菌落镜检下。
3m3的罐子染菌还是比较好查的。设备问题阀门是否内漏、冷却管是否穿孔、设备清洁是否到位、物料是否结块、灭菌操作是规范。空培能验证设备是不是有问题，0.3%——1%葡萄糖，少加点硫酸铵、磷酸二氢钾，有条件加点酵母膏，调下PH。
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4楼2023-02-15 15:31:57
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djg0810

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by lina陶 at 2023-02-22 15:01:18
阀门没漏，消毒的同事也说没问题。我也验证过不加菌种是没问题的，就是从种子罐移到发酵罐时就出问题了，但摇床培养出来的不是我们经常染的菌，不是每批都坏，有好有坏，没有专业的人指点头都大了
...

我是做大肠发酵大生产的，360m3罐。这边是这样监测无菌的
1、种子罐消后接种前培养基取肉汤培养。
2、种子罐移种前取种子液涂平板划线。
3、发酵罐接种前培养基取肉汤培养。
4、发酵过程间隔12h取发酵液涂平板划线。
5、补料消后也是要取肉汤培养的。
必须先找到染菌的时间点缩小排查范围。
比如你种子罐移种前的平板划线是没问题的，发酵罐消后接前的肉汤也是没问题的。然后刚移进去几个小时取样平板就有杂菌了，那大概率就移种过程有问题。
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6楼2023-03-01 15:16:35
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