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[求助] 请教各位大哥大姐:怎样防止RNA在纯化过程中降解?
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请教各位大哥大姐: 小弟提取RNA用的是CTAB 法,用等体积24:1抽提3次,然后用2/3体积异丙醇沉淀30分钟,70%酒精洗两次,晾干,溶于DEPC处理过的水中。 然后加入DNA酶处理,再用24:1抽提2次,2/3体积异丙醇沉淀30分钟,70%酒精洗两次,晾干,溶于DEPC处理过的水中。 初提的RNA质量还好,至少有1.5:1,但是经过纯化后质量就下降了,有时候是部分降解,有时候是完全降解,操作上应该没有问题了,但不知道为什么总是降解。 请各位高人指点迷津。谢谢 [ Last edited by 350784478 on 2009-9-16 at 09:52 ] |
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谢谢各位了,我是在考虑有没有更好的纯化的方法,我请实验室的博士帮忙提了几次,效果也不好,28S:18S都是0.9、0.8 ,部分降解,很郁闷的。