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[求助] 请教各位大哥大姐：怎样防止RNA在纯化过程中降解？
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请教各位大哥大姐： 小弟提取RNA用的是CTAB 法，用等体积24：1抽提3次，然后用2/3体积异丙醇沉淀30分钟，70%酒精洗两次，晾干，溶于DEPC处理过的水中。 然后加入DNA酶处理，再用24：1抽提2次，2/3体积异丙醇沉淀30分钟，70%酒精洗两次，晾干，溶于DEPC处理过的水中。 初提的RNA质量还好，至少有1.5：1，但是经过纯化后质量就下降了，有时候是部分降解，有时候是完全降解，操作上应该没有问题了，但不知道为什么总是降解。 请各位高人指点迷津。谢谢 [ Last edited by 350784478 on 2009-9-16 at 09:52 ] |
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2楼2009-09-15 12:21:26
3楼2009-09-15 12:56:13
4楼2009-09-15 13:26:53
zuodongyun
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
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- 散金: 5
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- 注册: 2009-02-24
- 性别: GG
- 专业: 基因组学
5楼2009-09-15 13:56:05
695
木虫 (职业作家)
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- 专业: 植物生理与生化
6楼2009-09-15 15:10:28
谢谢各位了，我是在考虑有没有更好的纯化的方法，我请实验室的博士帮忙提了几次，效果也不好，28S：18S都是0.9、0.8 ，部分降解，很郁闷的。 7楼2009-09-15 19:47:26