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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 易错PCR构建突变体库筛选优质突变体
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draxlx

新虫 (小有名气)

[交流] 易错PCR构建突变体库筛选优质突变体 已有1人参与

有没有做易错PCR的朋友交流一下啊。我导给我的课题就是用一个基因去做易错，但是按照我目前的情况来看，突变体库根本就不够大，平均做一次连接转化的转化子只有20个出头，做到现在还没有筛出一个很好的正向突变体，大部分转化子都是直接丧失酶活了（我的目的蛋白的一种酶）。再这么下去，毕业都成问题了。看了一些以易错为课题的硕博论文，好几千的突变体库才筛出来2-3个正向突变体。是感受态转化效率低的问题吗？
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1楼 2022-09-13 20:39:43
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啊哈哈i

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
感受态转化效率太低了，我们要求一个平板上要长200个菌落，我们课题组的突变体库基本上10000往上。

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2楼2023-05-29 10:06:41
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