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695木虫 (职业作家)
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测序问题求救
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我现在有个问题想跟大家讨论下，我把我的片段克隆到了pGEM T载体上，酶切验证了是我要的菌落，但是PCR的时候出现了问题，单正向引物能扩出多条带，而正反向引物合在一起只有一条目的带(见图：图中1-2是 M13F-M13R 重复；3-4是M13F only，现在我要是正向测序就遇到困难了，请大家给我指点迷津！ PCR程序： 95 3min 95 1min 60 1min 72 1min 30cycles 72 10min |
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