应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 酶切连接构建载体一直连接不上
51/1返回列表
查看: 1077  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 Milkttttea 的 5 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

Milkttttea

新虫 (初入文坛)

[交流] 酶切连接构建载体一直连接不上

切入DNA片段1385bp，载体4729bp

跑胶看亮度，片段大概10ng/ul，载体大概40ng/ul

片段加了15ul，载体2ul，buffer2ul，T4连接酶1ul，摩尔比大概1:6.5。

为什么一直连接不上呢？amp板上一个单克隆都没有

卡在这个实验已经一个月多了真的头秃了！

求帮助！

发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

青椒之路

» 猜你喜欢
1楼 2022-08-07 11:00:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

青椒之路

铜虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
送红花一朵
这个应该不难吧，可能还是配比的问题
赞一下 回复此楼
8楼2022-08-16 10:42:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

Milkttttea

新虫 (初入文坛)
连接酶用的是takara家的

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
2楼2022-08-07 11:04:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

司静Jing.

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
DNA片段质量不好吧（浓度 纯度）
赞一下 回复此楼
3楼2022-08-08 18:23:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Milkttttea

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 司静Jing. at 2022-08-08 18:23:18
DNA片段质量不好吧（浓度 纯度）

昨天又做了两板，载体53.2ng/ul，片段15.7ng/ul，仪器测得浓度，OD260/280都有1.8。1:3比例做了10体系，1:7做了20体系，都没有长单克隆，我真的好迷茫啊，到底问题出在哪里了

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
4楼2022-08-10 09:37:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料工程调剂 +6 咪咪空空 2026-03-12 6/300 2026-03-12 22:37 by Yy7400
[考研] 308 085701 四六级已过求调剂 +5 温乔乔乔乔 2026-03-12 8/400 2026-03-12 16:48 by 温乔乔乔乔
[考研] 307求调剂 +3 超级伊昂大王 2026-03-12 3/150 2026-03-12 15:49 by peike
[考研] 085701环境工程专硕求调剂 +8 幼稚园大班打手 2026-03-08 8/400 2026-03-12 15:12 by 每天只摆一小会
[考研] 材料工程调剂 +3 咪咪空空 2026-03-11 3/150 2026-03-12 15:02 by 每天只摆一小会
[考研] 材料与化工085600调剂求老师收留 +7 jiaanl 2026-03-11 7/350 2026-03-12 13:08 by Equinoxhua
[考研] 一志愿江南大学085701环境工程专硕总分287求调剂 +5 18266118446 2026-03-09 5/250 2026-03-11 16:51 by 2020015
[考研] 工科0856专硕化学工程269能调剂吗 +9 我想读研11 2026-03-10 9/450 2026-03-11 16:42 by 看开一点
[考研] 288求调剂 +13 王晓阳- 2026-03-09 18/900 2026-03-11 14:01 by Linda Hu
[考研] 材料专硕288分求调剂 一志愿211 +3 在家想你 2026-03-11 3/150 2026-03-11 08:13 by ms629
[考研] 调剂 +5 调剂的考研学生 2026-03-09 5/250 2026-03-10 22:13 by peike
[考研] 调剂 +5 呵唔哦豁 2026-03-10 5/250 2026-03-10 22:00 by 28375m
[考博] 26申博求助 +3 跳跃饼干 2026-03-10 4/200 2026-03-10 21:15 by Tntcnn
[考研] 求调剂！ +3 朔朔话 2026-03-09 3/150 2026-03-10 15:48 by houyaoxu
[考研] 0817一志愿苏州大学280复试调剂 +9 kk扛 2026-03-07 9/450 2026-03-10 14:20 by peike
[基金申请] PDF在线压缩软件 10+3 haxia 2026-03-08 4/200 2026-03-10 13:44 by lfy8008
[考研] 复试调剂 +6 呼呼？~+123456 2026-03-08 8/400 2026-03-10 11:36 by 呼呼？~+123456
[考研] 085600材料与化工 326 求调剂 +4 热爱生活ing 2026-03-09 4/200 2026-03-10 08:25 by Linda Hu
[硕博家园] 2026级硕士研究生招生/调剂 +3 知足常乐的乐 2026-03-06 5/250 2026-03-09 20:56 by 木瓜膏
[考研] 085701环境工程317分求调剂 +9 6汆尼9 2026-03-07 9/450 2026-03-08 06:41 by 刘兵
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭