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单核吞噬细胞系统吞噬功能封闭动物模型
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单核吞噬细胞系统吞噬功能封闭动物模型 【造模机制】单核吞噬细胞系统(mononuclear phagocyte system,MPS)的吞噬功能与循环免疫复合物(IC)在局部沉积呈负相关。用热凝聚 IgG(HAG)代替 IC,给小鼠静脉注射，当HAG剂量达 Img/g时,MPS吞噬 HAG的能力达到饱和。致使造成 MPS吞噬功能被封闭。 【造模方法】选用纯品系小鼠，仪器药品，721分光光度计，热凝聚 IgG(HAG）等。模型制作： 1.碳悬液的制备人丙种球蛋白和印度墨汁，应用时将其制备成1：4稀释的碳悬液。 2.HAG的制备 用凝胶层析法分离人IgG,制成浓度为 40mg/ml的溶液，将其置 63℃水浴中作用25分钟，取出后分装，一20℃保存备用。 3.小鼠碳廓清实验 取实验小鼠，使尾静脉充分扩张后，向尾静脉注射碳悬液0.01ml/g。于注射后5分钟、15分钟、20分钟分别自腿内静脉丛取血 20μ1，加于2m10.1%NazCOs溶液中，充分摇匀，然后用 721分光光度计在 675nm 波长处测定上述各样品的光密度，计算碳廓清指数 K。 4.不同剂量HAG对MIPS吞噬功能的影响 取35只纯系小鼠，随机分成5组：第1组尾静脉注射生理盐水，第 2、3、4、5组分别经尾静脉给予 0.4mg/g、0.8mg/g、1.0mg/g、1,4mg/g的HAG。注射30分钟后，各组小鼠尾静脉再注射 0.01ml/g的碳悬液。最后经5分钟、15分钟、20分钟后从眼内静脉丛取血 20μ1检测光密度，并计算碳廓清指数 K。 5.模型检测计算碳廓清指数K。 【模型特点】HAG可抑制碳廓清作用，且随着 HAG 剂量的增加，碳廓清指数 K逐渐减少。当注射HAG达1mg/g时，再增加 HAG的剂量，碳廓清指数 K亦不再减小，同时肝脾的荧光强度也不再发生改变。即当 HAG剂量达 1mg/g时,MPS吞噬 HAG 的能力达到饱和，因而再增加 HAG的剂量，碳廓清指数不再减小。 【注意事项】尾静脉注射时应注意一定要将试剂全部注入静脉，否则会影响试验结果的准确性。 【应用范围】该模型能筛选出增强 MPS 处于饱和状态下吞噬功能的药物，有助于治疗免疫复合物性疾病。 |
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