| 查看: 1342 | 回复: 7 | ||
| 【悬赏金币】回答本帖问题，作者draxlx将赠送您 30 个金币 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
draxlx新虫 (小有名气)
|
[求助]
构建且成功表达过的重组质粒 复测数据时不表达了 已有1人参与
|
|
|
各位大佬，诚心求助。 4月份的时候，我用无缝克隆技术构建了一个 "目的基因+耐热基因+表达载体" 的重组质粒 ，成功表达了“目的基因+耐热基因”的融合蛋白，测其酶学特性显示 ：融合蛋白比野生酶在温度稳定性方面有了极大改善。 现在7月份，我用当初保藏的菌种 再次扩培、破胞、纯化，复测其温度稳定性，发现与野生酶一样，重复不出当初的数据。 跑过菌液电泳，确实是重组质粒的菌液没有拿错。 又跑了蛋白胶，结果没有融合蛋白的表达条带，反而有野生酶的表达条带。（怪不得复测的时候，融合蛋白与野生酶的数据几乎一模一样，差别十分微小） 有没有朋友出现过这种情况啊？ （4月份所测的数据是没有错的，因为当时短时间内有3个人都测了，三个人测出来的数据是高度统一的。） |
回复此楼» 猜你喜欢
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
-
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有274人回复
-
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点
已经有0人回复
-
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用
已经有0人回复
-
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点
已经有0人回复
-
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？
已经有0人回复
-
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析
已经有0人回复
-
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性
已经有0人回复
-
恩诺沙星（Enrofloxacin）科研解析：分子特征、LC-MS/MS 检测与实验室使用要点
已经有0人回复
-
Calderasib理化性质与实验操作技术笔记
已经有0人回复
draxlx
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 192
- 散金: 20
- 帖子: 63
- 在线: 2.5小时
- 虫号: 29159617
- 注册: 2022-03-15
- 专业: 微生物生理与生物化学
7楼2022-07-31 16:09:28
2楼2022-07-29 13:03:58
3楼2022-07-29 16:46:09
draxlx
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 192
- 散金: 20
- 帖子: 63
- 在线: 2.5小时
- 虫号: 29159617
- 注册: 2022-03-15
- 专业: 微生物生理与生物化学
4楼2022-07-31 13:39:34
