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基因工程，构建表达质粒已有3人参与
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| 请问大佬们，构建表达质粒时，为验证目的片段与载体是否连接上，用NEB的T4连接酶连接后做了转化、菌液PCR可以扩出目的大小条带，提质粒后仍用NEB的酶做双酶切（50μl体系），质粒1μg定量，两种酶各用1μl, 37摄氏度切了7h也最终也没切开会是什么原因呢？用该质粒去扩目的片段也可以扩出来。酶加少了吗？ |
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画画的bb
铁虫 (初入文坛)
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