应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 微米和纳米 » 学术交流 » 羧基聚苯乙烯微球表面抗体修饰
51/1返回列表
查看: 2779  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

流氓额怕水

新虫 (小有名气)

[交流] 羧基聚苯乙烯微球表面抗体修饰 已有3人参与

请问大家是怎么在微球表面进行抗体修饰的呀？我是在在MES缓冲液中加入100μl 羧基修饰的PS球，然后用EDC/NHS进行活化处理，洗球后在加入0.5mg/ml的单抗，4℃保存一夜。但是后面检测蛋白并没有信号感觉是抗体没有修饰上去，不知道有没有大佬做过类似的修饰，还请帮助
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2022-05-21 14:26:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

consequently

金虫 (小有名气)

大男孩
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可以参考我的文章偶联蛋白
Analytical Chemistry  2020, 92, 17, 12088-12096
赞一下(1人) 回复此楼
postDocinSIAT,CAS
8楼2022-06-02 17:44:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

zhaim1234

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
字面意思，4℃偶联？离心后有没有超声？没有淬灭/封闭？描述太简单，详细流程
赞一下 回复此楼
2楼2022-05-24 10:42:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

流氓额怕水

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhaim1234 at 2022-05-24 10:42:28
字面意思，4℃偶联？离心后有没有超声？没有淬灭/封闭？描述太简单，详细流程

太谢谢你的回复。我是在加入抗体后在4℃进行偶联一夜，离心后没有进行超声，因为怕超声会把抗体破坏掉。封闭的步骤是最后加入1ml 1%BSA进行的
赞一下 回复此楼
3楼2022-05-24 13:45:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaim1234

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
一般常规抗体偶联不需要4℃，除非你的微球供应商操作手册有明确要求；每步离心后需要充分再悬浮，保证微球的分散状态，普通振荡或涡旋达不到需求，量少水浴超声分散，量多要上超声设备了，所谓破坏抗体情况多在于超声局部温度升高所致，优化超声控制，你可以控制单次超声秒数及频率和总时长，同时可以上冰浴；如果没有明确无需洗涤，活化前可能需要洗球，去除杂质及多余的表面活性剂；活化时间不易过长；MES缓冲液适合洗涤及活化，PH不适合偶联，需要按照7.4的PH基础去优化偶联缓冲液，但该PH及以上条件下羧基活化中间体不稳定，所以也就没必要过夜，37℃摇床偶联1小时左右即可，封闭后的微球保存液也一样要合适，可以维持标记物稳定
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

流氓额怕水
4楼2022-05-24 15:25:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-10-01 21:59 by Equinoxhua
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +7 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 8/400 2026-10-01 19:08 by Equinoxhua
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 4/200 2026-10-01 09:23 by Equinoxhua
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 (EPI+-1)(金币-50) +3 cqwQDCxMcL3I 2026-09-29 4/200 2026-09-30 16:52 by Z9YWQ5EAO3qp
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 cqwQDCxMcL3I 2026-09-29 6/300 2026-09-30 16:14 by Z9YWQ5EAO3qp
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 cqwQDCxMcL3I 2026-09-29 4/200 2026-09-30 13:35 by C3vABopYbZJS
[教师之家] 某top大学教授说“能够在市场中兑现的能力才是真能力”无比同意！ +10 zju2000 2026-09-26 13/650 2026-09-30 10:26 by yexuqing
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-29 19:27 by cqwQDCxMcL3I
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:54 by yCO1Ll7aHtsw
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:47 by yCO1Ll7aHtsw
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:37 by etmYJ6d2rquH
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:03 by etmYJ6d2rquH
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 4/200 2026-09-29 15:15 by etmYJ6d2rquH
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 15:04 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-29 13:50 by etmYJ6d2rquH
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:42 by ZvyPK8n6Nfki
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:28 by ZvyPK8n6Nfki
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:12 by b8fCuTHqckEt
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 3/150 2026-09-28 19:08 by 9lS3ad5oOymn
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭