24小时热门版块排行榜

返回列表

【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 eric201212 的 2 个金币，回帖就立即获得 1 个金币，每人有 1 次机会

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

eric201212

铜虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 80.8
帖子: 70
在线: 25.8小时
虫号: 23485707

[交流] 表达的GST蛋白一直不挂柱，无法纯化

8M尿素过夜溶解包涵体，梯度透析复性（复性液配方：尿素8/6/4/4/0M(即PBS)， 50mM TB 8.0， 100mM NaCl， 10mM DTT， 0.5mM GSSG， 5%甘油）每个梯度12h，最后蛋白部分有活性，但是无法纯化(磁珠和树脂柱子都试了) 蛋白不挂柱子。
做了大半年了，希望有经验的各位朋友不吝赐教，谢谢~

回复此楼

» 猜你喜欢

投稿Elsevier的杂志（返修），总是在选择OA和subscription界面被踢皮球已经有6人回复
中科院杭州医学所招收博士生一名（生物分析化学、药物递送）已经有4人回复
求个博导看看已经有18人回复
自荐读博已经有6人回复
青基代表作，AAAI之类的A会的special track在国内认可度高吗？还是归为workshop之流？已经有3人回复
上海工程技术大学【激光智能制造】课题组招收硕士已经有6人回复
上海工程技术大学张培磊教授团队招收博士生已经有4人回复
临港实验室与上科大联培博士招生1名已经有9人回复
写了一篇“相变储能技术在冷库中应用”的论文，论文内容以实验为主，投什么期刊合适？已经有6人回复

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2022-05-17 21:20:46

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

SuYuo

铁虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 135.4
帖子: 58
在线: 5.4小时
虫号: 16727375

★
eric201212(金币+1): 谢谢参与

GST标签变性后可能会失去挂柱的能力

赞一下

回复此楼

10楼2022-11-16 16:04:31

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 12 个回答

lin_7722

铜虫 (正式写手)

应助: 4 (幼儿园)
金币: 643.9
帖子: 339
在线: 29.6小时
虫号: 28234544

★
eric201212(金币+1): 谢谢参与

重复多次几次挂住操作试试？蛋白实验，我依稀记得老板研讨会讲过，多次挂住操作可以提高回收率。可你这个一直做不出来，有没有可能是之前哪个环节出了问题。下面是一些tips，可以考量一下修改之前实验操作：没有表达; 构建质粒操作设计缺陷; 表达系统选择不合适; 纯化标签没有充分暴露; 纯化工艺需要优化。
祝好~

赞一下(2人)

回复此楼

3楼2022-05-26 16:47:43

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖