24小时热门版块排行榜

返回列表

【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 eric201212 的 2 个金币，回帖就立即获得 1 个金币，每人有 1 次机会

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

eric201212

铜虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 80.8
帖子: 70
在线: 25.8小时
虫号: 23485707

[交流] 表达的GST蛋白一直不挂柱，无法纯化

8M尿素过夜溶解包涵体，梯度透析复性（复性液配方：尿素8/6/4/4/0M(即PBS)， 50mM TB 8.0， 100mM NaCl， 10mM DTT， 0.5mM GSSG， 5%甘油）每个梯度12h，最后蛋白部分有活性，但是无法纯化(磁珠和树脂柱子都试了) 蛋白不挂柱子。
做了大半年了，希望有经验的各位朋友不吝赐教，谢谢~

回复此楼

» 猜你喜欢

有时候真觉得大城市人没有县城人甚至个体户幸福已经有11人回复
表哥与省会女结婚，父母去帮带孩子被省会女气回家生重病了已经有7人回复
同年申请2项不同项目，第1个项目里不写第2个项目的信息，可以吗已经有8人回复
依托企业入选了国家启明计划青年人才。有无高校可以引进的。已经有7人回复
依托企业入选了国家启明计划青年人才。有无高校可以引进的。已经有10人回复
天津大学招2026.09的博士生，欢迎大家推荐交流（博导是本人）已经有9人回复
有院领导为了换新车，用横向课题经费买了俩车已经有10人回复
AI 太可怕了，写基金时，提出想法，直接生成的文字比自己想得深远，还有科学性已经有6人回复

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2022-05-17 21:20:46

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

lin_7722

铜虫 (正式写手)

应助: 4 (幼儿园)
金币: 643.9
帖子: 339
在线: 29.6小时
虫号: 28234544

★
eric201212(金币+1): 谢谢参与

重复多次几次挂住操作试试？蛋白实验，我依稀记得老板研讨会讲过，多次挂住操作可以提高回收率。可你这个一直做不出来，有没有可能是之前哪个环节出了问题。下面是一些tips，可以考量一下修改之前实验操作：没有表达; 构建质粒操作设计缺陷; 表达系统选择不合适; 纯化标签没有充分暴露; 纯化工艺需要优化。
祝好~