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请教关于Northern blot 中需要注意的 环节
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最近刚开始做Northern blot准备 所用的试剂盒是Dig DNA Labeling and Detection kit cat.No.11093657910 对于其中的一些操作还是有些不清楚，请大家指教： part1：首先是RNA电泳 这个步骤中所需要的电泳缓冲液，上样缓冲液，在配制的时候是不是必须都用灭菌的DEPC水处理过， 就是配制的时候先把瓶子，量筒，烧杯，玻璃棒烘好，DEPC水灭好，再进行配制？ 还有电泳槽和制胶的东西是怎么处理的？ Part2：转膜 变性后的RNA进行转膜就不需要像southern一样变性，中和了，转膜的时候，胶是和尼龙膜紧密接触的，那么尼龙膜，whatmann滤纸需要去除RNAase么？紫外交联后还要继续防止降解么？ part3：杂交与显影 我用的探针是DNA探针，后面的操作是否就如southern ？ [ Last edited by 350784478 on 2009-9-9 at 09:22 ] |
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