应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 转基因 » 求助：做植物miRNA定量 CT值总是在30以上
51/1返回列表
查看: 6596  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者白芷zmy将赠送您 5 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

白芷zmy

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助：做植物miRNA定量 CT值总是在30以上

我最近在做植物miRNA的荧光定量，我用了很多方法跑出来的miRNA 的CT值都在33以上。
茎环法：提转基因拟南芥的总RNA，利用茎环引物反转录，然后跑定量，内参U6的CT值大概在20，但是目的miRNA CT值在33以上；
加尾法：用生工的加尾法试剂，内参的CT和目的miRNA CT值都30以上了。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2022-01-07 00:31:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

本帖仅楼主可见
赞一下
4楼2022-01-08 00:05:24
已阅   回复此楼   编辑   查看我的主页
查看全部 9 个回答

匿名

本帖仅楼主可见
赞一下
2楼2022-01-07 17:14:00
已阅   回复此楼   编辑   查看我的主页

白芷zmy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by MOK呀 at 2022-01-07 17:14:00
qPCR的话一般程序设置40个循环，ct值大于35的时候数据可能就不太可靠了，不过也要看对应的扩增曲线和溶解峰，如果溶解峰比较尖锐，单一，而且同一MiRNA的重复性好的话，我觉得数据可以用的，实在不放心就用半定量表 ...

谢谢大佬回复。我现在比较怀疑是模板量的问题，我目前提RNA用的是生工的试剂盒，他上面是说可以提miRNA，不过我感觉效果一般，我现在先加大我的模板量试一试，如果不行，就换另一种miRNA试剂盒。
赞一下 回复此楼
3楼2022-01-07 19:09:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

白芷zmy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by MOK呀 at 2022-01-08 00:05:24
对了，楼主请问你画过miRNA的二级结构吗？

我没有画过哎
回复此楼
5楼2022-01-08 10:45:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 2026申博自荐 六级440电催化方向 +3 樱落成影花成双 2026-03-05 3/150 2026-03-06 07:22 by 轻松不少随
[考研] 一志愿南京大学资源与环境专业283分求调剂 +3 追云?? 2026-03-04 3/150 2026-03-05 09:47 by 热情沙漠
[考研] 环境工程专硕307 一志愿211 四六级已过 求调剂 +5 ccc! 2026-03-03 6/300 2026-03-05 09:42 by 热情沙漠
[考研] 281电子信息求调剂 +5 jhtfeybgj 2026-03-02 9/450 2026-03-05 09:36 by 085400调剂党
[考研] 材料328求调剂 +10 一个萝卜02 2026-03-03 10/500 2026-03-05 09:31 by oxidpl
[考研] 0856材料与化工，270求调剂 +17 YXCT 2026-03-01 20/1000 2026-03-05 09:22 by 一切OK
[考研] 085600材料与化工（高分子）290分求调剂 +8 wengyujian 2026-03-04 8/400 2026-03-05 08:37 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿985材料与化工 326分求调剂 +3 Hz795795 2026-03-04 3/150 2026-03-04 20:54 by wutongshun
[考研] 295求调剂 +4 小赛不吃香菜 2026-03-04 4/200 2026-03-04 16:13 by sslc1985
[考博] 26申博 +5 north， 2026-02-28 5/250 2026-03-04 10:01 by StarAura
[论文投稿] EST拒稿重投 5+3 15102603076 2026-03-02 3/150 2026-03-04 00:51 by bobvan
[考研] 环境工程学硕288求助调剂 +7 多吃亿口芝士 2026-03-02 7/350 2026-03-03 23:00 by zhukairuo
[考研] 环境调剂 +8 chenhanheng 2026-03-02 8/400 2026-03-03 22:13 by 刘兵
[考研] 化工专硕调剂 +4 利好利好. 2026-03-03 7/350 2026-03-03 21:30 by L135790
[考研] 材料270求调剂 6+6 Eiiiio 2026-03-01 11/550 2026-03-03 15:04 by Phoebelala
[考研] 299求调剂 +5 kkcoco25 2026-03-02 9/450 2026-03-03 12:55 by 公瑾逍遥
[考研] 272求调剂 +9 材紫有化 2026-02-28 9/450 2026-03-02 20:22 by hypershenger
[考研] 261求调剂 +3 陆lh 2026-03-01 3/150 2026-03-02 19:32 by zhukairuo
[考研] 1 +5 2026计算机_诚心 2026-03-01 8/400 2026-03-02 11:05 by 汪！？！
[考研] 寻找调剂 +4 LYidhsjabdj 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:56 by sunny81
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭