应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 转基因 » 求助：做植物miRNA定量 CT值总是在30以上
91/1返回列表
查看: 6685  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者白芷zmy将赠送您 5 个金币

白芷zmy

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助：做植物miRNA定量 CT值总是在30以上

我最近在做植物miRNA的荧光定量，我用了很多方法跑出来的miRNA 的CT值都在33以上。
茎环法：提转基因拟南芥的总RNA，利用茎环引物反转录，然后跑定量，内参U6的CT值大概在20，但是目的miRNA CT值在33以上；
加尾法：用生工的加尾法试剂，内参的CT和目的miRNA CT值都30以上了。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2022-01-07 00:31:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

本帖仅楼主可见
赞一下
2楼2022-01-07 17:14:00
已阅   回复此楼   编辑   查看我的主页

白芷zmy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by MOK呀 at 2022-01-07 17:14:00
qPCR的话一般程序设置40个循环，ct值大于35的时候数据可能就不太可靠了，不过也要看对应的扩增曲线和溶解峰，如果溶解峰比较尖锐，单一，而且同一MiRNA的重复性好的话，我觉得数据可以用的，实在不放心就用半定量表 ...

谢谢大佬回复。我现在比较怀疑是模板量的问题，我目前提RNA用的是生工的试剂盒，他上面是说可以提miRNA，不过我感觉效果一般，我现在先加大我的模板量试一试，如果不行，就换另一种miRNA试剂盒。
赞一下 回复此楼
3楼2022-01-07 19:09:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

本帖仅楼主可见
赞一下
4楼2022-01-08 00:05:24
已阅   回复此楼   编辑   查看我的主页

白芷zmy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by MOK呀 at 2022-01-08 00:05:24
对了，楼主请问你画过miRNA的二级结构吗？

我没有画过哎
回复此楼
5楼2022-01-08 10:45:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

本帖仅楼主可见
赞一下
6楼2022-01-08 16:09:16
已阅   回复此楼   编辑   查看我的主页

匿名

本帖仅楼主可见
赞一下
7楼2022-01-08 17:00:38
已阅   回复此楼   编辑   查看我的主页

我一吃就胖

新虫 (初入文坛)
我也遇到了这种情况,请问楼主解决了吗
赞一下 回复此楼
8楼2022-02-16 16:00:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

罗均

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 白芷zmy at 2022-01-07 19:09:46
谢谢大佬回复。我现在比较怀疑是模板量的问题，我目前提RNA用的是生工的试剂盒，他上面是说可以提miRNA，不过我感觉效果一般，我现在先加大我的模板量试一试，如果不行，就换另一种miRNA试剂盒。...

你后面的实验结果咋样呢？我也遇到类似的问题。
赞一下 回复此楼
9楼2025-05-19 20:59:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 白芷zmy 的主题更新
91/1返回列表
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学调剂 290分有科研经历，论文在投 +3 腻腻gk 2026-03-14 3/150 2026-03-15 17:28 by 小物理化学
[考研] 0856专硕279求调剂 +5 加油加油！? 2026-03-15 5/250 2026-03-15 11:58 by 2020015
[考研] 材料专硕326求调剂 +4 墨煜姒莘 2026-03-15 4/200 2026-03-15 11:02 by dyw
[基金申请] 现在如何回避去年的某一个专家，不知道名字 +3 zk200107 2026-03-12 6/300 2026-03-14 17:13 by zk200107
[考研] 【0703化学调剂】-一志愿华中师范大学-六级475 +5 Becho359 2026-03-11 5/250 2026-03-14 11:35 by 哦哦123
[考研] 331求调剂（0703有机化学 +5 ZY-05 2026-03-13 6/300 2026-03-14 10:51 by Jy?
[考研] 296求调剂 +5 Xinyu Wu311 2026-03-09 5/250 2026-03-14 03:05 by JourneyLucky
[考研] 0703化学求调剂 +5 很老实人 2026-03-09 5/250 2026-03-14 02:57 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 清风问长安 2026-03-09 3/150 2026-03-14 02:15 by JourneyLucky
[考研] 云南财经大学信息学院计算机学硕专硕学位点 +3 zjptai 2026-03-10 5/250 2026-03-14 01:23 by 飞行琦
[考研] 321求调剂 +3 CUcat 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:25 by JourneyLucky
[考研] 318求调剂 +3 李新光 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:21 by JourneyLucky
[考研] 311求调剂 +8 zchqwer 2026-03-10 8/400 2026-03-14 00:01 by JourneyLucky
[考研] 285 求调剂 资源与环境 一志愿北京化工大学 +3 未名考生 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:04 by JourneyLucky
[考研] 求调剂（材料与化工327） +4 爱吃香菜啦 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:11 by JourneyLucky
[考研] 求材料调剂 +5 隔壁陈先生 2026-03-12 5/250 2026-03-13 22:03 by 星空星月
[考研] 四川大学085601材料工程专硕 初试294求调剂 +4 祝我们好在冬天 2026-03-11 4/200 2026-03-13 21:39 by peike
[考研] 285求调剂 +4 ytter 2026-03-12 4/200 2026-03-13 14:48 by jxchenghu
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:30 by 求调剂zz
[考研] 材料调剂，307分 +13 张泳铭1 2026-03-09 17/850 2026-03-13 11:09 by 薛云鹏
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭