24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
南方科技大学公共卫生及应急管理学院2025级博士研究生招生报考通知
查看: 2162  |  回复: 4
【悬赏金币】回答本帖问题,作者木子君君将赠送您 10 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

木子君君

新虫 (初入文坛)

[求助] 想问一下条带弥散怎么办已有2人参与

第一次pcr产物跑胶什么也没有,然后用pcr产物进行二次扩增,用了Q5高保真酶但是跑胶条带弥散,主要是我有很多样品都这样,我的DNA是用试剂盒提取的感觉应该没什么问题,引物是我老师之前课题组师妹用过的,而且有些p出来了,只不过不特异,已经优化过体系了,还是形不成条带,我的条带300多bp,做的温度梯度pcr条带全是弥散的,无法得到一条完整的条带,想问问再怎么做才好啊,才能出来不弥散的条带啊?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jmqt7140

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

5楼2021-12-31 14:14:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

kshdd

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你换个引物试试看,其它都尝试过的话,那就是引物的问题。

1.样品是纯菌还是环境样?
2.纯菌是一样的菌嘛?
3.环境样是一样的环境样嘛?
2楼2021-10-22 11:35:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

局也土豆

新虫 (小有名气)

你的退火时间会不会太长了,这个也会影响条带弥散的

发自小木虫Android客户端
3楼2021-10-22 18:17:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiayuran

银虫 (小有名气)

调整一下体系里镁离子含量呢,可能是镁离子含量高导致酶活性高,出现了非特异性条带

发自小木虫Android客户端
4楼2021-11-08 07:40:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
信息提示
请填处理意见