应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 求助于各位老师！过表达蛋白条带异常，过表达条带不与内源重合
51/1返回列表
查看: 2354  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者龙猫和阿里将赠送您 20 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

龙猫和阿里

铜虫 (初入文坛)

[求助] 求助于各位老师！过表达蛋白条带异常，过表达条带不与内源重合

各位老师，同门好，我面临的主要问题是，用PCDH（载体图谱如下图1），带有3Flag标签，及T2A元件
构建目的蛋白过表达载体，病毒包装后，经过三天puro药筛，对药筛后得到的细胞进行WB检测，WB结果如下图2，293稳赚细胞株结果显示，过表达条带位于内源条带上方，分子量大小明显大于内源条带，而预测蛋白分子量为70.8kDa, 表达蛋白预测分子量为75.91kDa, 用10%的分离胶会有如此明显差异吗，12%的胶我也跑过，也是明显的两条带。

恳请各位老师，同门指点！

求助于各位老师！过表达蛋白条带异常，过表达条带不与内源重合
图1.jpg


求助于各位老师！过表达蛋白条带异常，过表达条带不与内源重合-1
图2.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2021-10-12 09:41:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

龙猫和阿里

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 我不再玩灬 at 2021-10-22 17:03:57
可不可以卖你实验室的那个 mt-mKeima 质粒呀

您好，这个得问过老板，才能决定，可以私信留下邮箱，最好是导师的，谢谢！
赞一下 回复此楼
6楼2021-10-25 10:46:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

紫莲碧嫣

新虫 (正式写手)
可不可能是因为加了3Flag？它本身也有几KD

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2021-10-12 16:58:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

龙猫和阿里

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 紫莲碧嫣 at 2021-10-12 16:58:23
可不可能是因为加了3Flag？它本身也有几KD

10%的胶，然后分子量在70上，我总觉得5kDa不可能分这么开
赞一下 回复此楼
3楼2021-10-12 20:19:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

紫莲碧嫣

新虫 (正式写手)
应该是的，marker也没有那么严格，这么小只能看个大概

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2021-10-12 20:43:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭