24小时热门版块排行榜    

查看: 1832  |  回复: 7
【悬赏金币】回答本帖问题,作者龙猫和阿里将赠送您 20 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

龙猫和阿里

铜虫 (初入文坛)

[求助] 求助于各位老师!过表达蛋白条带异常,过表达条带不与内源重合

各位老师,同门好,我面临的主要问题是,用PCDH(载体图谱如下图1),带有3Flag标签,及T2A元件
构建目的蛋白过表达载体,病毒包装后,经过三天puro药筛,对药筛后得到的细胞进行WB检测,WB结果如下图2,293稳赚细胞株结果显示,过表达条带位于内源条带上方,分子量大小明显大于内源条带,而预测蛋白分子量为70.8kDa, 表达蛋白预测分子量为75.91kDa, 用10%的分离胶会有如此明显差异吗,12%的胶我也跑过,也是明显的两条带。

恳请各位老师,同门指点!

求助于各位老师!过表达蛋白条带异常,过表达条带不与内源重合
图1.jpg


求助于各位老师!过表达蛋白条带异常,过表达条带不与内源重合-1
图2.jpg
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

龙猫和阿里

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 紫莲碧嫣 at 2021-10-12 16:58:23
可不可能是因为加了3Flag?它本身也有几KD

10%的胶,然后分子量在70上,我总觉得5kDa不可能分这么开
3楼2021-10-12 20:19:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

紫莲碧嫣

新虫 (正式写手)

可不可能是因为加了3Flag?它本身也有几KD

发自小木虫Android客户端
2楼2021-10-12 16:58:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

紫莲碧嫣

新虫 (正式写手)

应该是的,marker也没有那么严格,这么小只能看个大概

发自小木虫Android客户端
4楼2021-10-12 20:43:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我不再玩灬

新虫 (小有名气)

可不可以卖你实验室的那个 mt-mKeima 质粒呀
keep in good health, and not die.
5楼2021-10-22 17:03:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 333求调剂 +6 87639 2026-03-21 10/500 2026-03-23 10:41 by Iveryant
[考研] 310求调剂 +4 baibai1314 2026-03-16 4/200 2026-03-22 20:19 by edmund7
[考研] 289材料与化工(085600)B区求调剂 +3 这么名字咋样 2026-03-22 4/200 2026-03-22 17:56 by 云民大李老师
[考研] 求调剂 +6 十三加油 2026-03-21 6/300 2026-03-22 17:00 by i_cooler
[考研] 289求调剂 +7 怀瑾握瑜l 2026-03-20 7/350 2026-03-22 15:57 by ColorlessPI
[考研] 298求调剂一志愿211 +3 上岸6666@ 2026-03-20 3/150 2026-03-22 15:50 by ColorlessPI
[考研] 311求调剂 +3 26研0 2026-03-20 3/150 2026-03-22 14:46 by ColorlessPI
[考研] 0856材料专硕353求调剂 +4 NIFFFfff 2026-03-20 4/200 2026-03-22 09:49 by 2026paper
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分,一志愿四川大学,诚心求调剂 +11 吃吃吃才有意义 2026-03-19 11/550 2026-03-21 18:23 by 学员8dgXkO
[考研] 材料学硕333求调剂 +3 北道巷 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:17 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +14 chaojifeixia 2026-03-19 15/750 2026-03-21 13:24 by zhukairuo
[考研] 材料学学硕080502 337求调剂-一志愿华中科技大学 +4 顺顺顺mr 2026-03-18 5/250 2026-03-21 10:22 by luoyongfeng
[考研] 083200学硕321分一志愿暨南大学求调剂 +3 innocenceF 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:35 by JourneyLucky
[考研] 271材料工程求调剂 +8 .6lL 2026-03-18 8/400 2026-03-21 00:58 by JourneyLucky
[考研] 考研调剂求学校推荐 +3 伯乐29 2026-03-18 5/250 2026-03-20 22:59 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
[考研] 材料,纺织,生物(0856、0710),化学招生啦 +3 Eember. 2026-03-17 9/450 2026-03-18 10:28 by Eember.
信息提示
请填处理意见