24小时热门版块排行榜    

查看: 1839  |  回复: 7
【悬赏金币】回答本帖问题,作者龙猫和阿里将赠送您 20 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

龙猫和阿里

铜虫 (初入文坛)

[求助] 求助于各位老师!过表达蛋白条带异常,过表达条带不与内源重合

各位老师,同门好,我面临的主要问题是,用PCDH(载体图谱如下图1),带有3Flag标签,及T2A元件
构建目的蛋白过表达载体,病毒包装后,经过三天puro药筛,对药筛后得到的细胞进行WB检测,WB结果如下图2,293稳赚细胞株结果显示,过表达条带位于内源条带上方,分子量大小明显大于内源条带,而预测蛋白分子量为70.8kDa, 表达蛋白预测分子量为75.91kDa, 用10%的分离胶会有如此明显差异吗,12%的胶我也跑过,也是明显的两条带。

恳请各位老师,同门指点!

求助于各位老师!过表达蛋白条带异常,过表达条带不与内源重合
图1.jpg


求助于各位老师!过表达蛋白条带异常,过表达条带不与内源重合-1
图2.jpg
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我不再玩灬

新虫 (小有名气)

可不可以卖你实验室的那个 mt-mKeima 质粒呀
keep in good health, and not die.
5楼2021-10-22 17:03:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

紫莲碧嫣

新虫 (正式写手)

可不可能是因为加了3Flag?它本身也有几KD

发自小木虫Android客户端
2楼2021-10-12 16:58:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

龙猫和阿里

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 紫莲碧嫣 at 2021-10-12 16:58:23
可不可能是因为加了3Flag?它本身也有几KD

10%的胶,然后分子量在70上,我总觉得5kDa不可能分这么开
3楼2021-10-12 20:19:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

紫莲碧嫣

新虫 (正式写手)

应该是的,marker也没有那么严格,这么小只能看个大概

发自小木虫Android客户端
4楼2021-10-12 20:43:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 286求调剂 +11 Faune 2026-03-21 11/550 2026-03-25 10:11 by 雾散后相遇lc
[考研] 材料学求调剂 +6 Stella_Yao 2026-03-20 6/300 2026-03-25 00:37 by baoball
[考研] 求调剂 +5 林之夕 2026-03-24 5/250 2026-03-24 17:16 by dick_runner
[考研] 080500求调剂 +3 zzzzfan 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:38 by barlinike
[考研] 307求调剂 +5 超级伊昂大王 2026-03-24 5/250 2026-03-24 15:46 by 星空星月
[考研] 一志愿哈工大,085400,320,求调剂 +3 gdlf9999 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:08 by 搏击518
[考研] 一志愿北京化工大学 070300 学硕 336分 求调剂 +7 vv迷 2026-03-22 7/350 2026-03-23 23:44 by Txy@872106
[考研] 材料专硕英一数二306 +8 z1z2z3879 2026-03-18 8/400 2026-03-23 20:49 by baobaoye
[考研] 一志愿陕师大生物学071000,298分,求调剂 +3 SYA! 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:09 by macy2011
[考研] 生物学一志愿985,分数349求调剂 +6 zxts12 2026-03-21 9/450 2026-03-23 18:37 by macy2011
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
[考研] 材料学硕301分求调剂 +7 Liyouyumairs 2026-03-21 7/350 2026-03-21 22:31 by peike
[考研] 求调剂 +3 13341 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:28 by 学员8dgXkO
[考研] 材料学硕333求调剂 +3 北道巷 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:17 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-20 7/350 2026-03-21 16:36 by barlinike
[考研] 一志愿中海洋材料工程专硕330分求调剂 +8 小材化本科 2026-03-18 8/400 2026-03-20 23:16 by JourneyLucky
[考研] 考研调剂求学校推荐 +3 伯乐29 2026-03-18 5/250 2026-03-20 22:59 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:15 by JourneyLucky
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
[考研] 086500 325 求调剂 +3 领带小熊 2026-03-19 3/150 2026-03-20 18:38 by 尽舜尧1
信息提示
请填处理意见