应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » CRISPR/Cas9敲除
71/1返回列表
查看: 1219  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者言宸儿将赠送您 10 个金币

言宸儿

新虫 (初入文坛)

[求助] CRISPR/Cas9敲除 已有1人参与

利用CRISPR/Cas9敲除某20bp的序列，不仅没敲掉却造成这20不怕序列中几个剪辑发生突变，并造成之后的序列频繁发生点突变是什么情况，有人了解可以赐教吗？

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2021-09-10 21:07:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

言宸儿

新虫 (初入文坛)
利用CRISPR/Cas9敲除某20bp的序列，不仅没敲掉却造成这20bp序列中几个碱基发生突变，并造成之后的序列频繁发生点突变是什么情况，有人了解可以赐教吗？
赞一下 回复此楼
2楼2021-09-10 21:21:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

风中你我

银虫 (小有名气)
多做几次，多挑选几个

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2021-09-12 15:28:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
本帖仅楼主可见
赞一下
4楼2021-09-13 09:13:13
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

言宸儿

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sxrvd42 at 2021-09-13 09:13:13
描述的有点不清楚，敲掉20bp，是设计的两个靶点吗？这种精确敲除很难吧，要是单靶点一般还是以点突变和小InDEL为主，缺失的情况也有，就是较少，而且恰好是20bp的概率更小

对的，靶向一个基因设计2个sgRNA，也是为了增加knock out的概率。有试过单靶点，但是在线虫内利用co-CRISPR进行敲除，筛选得到的F1代编辑体数量太少。所以更多用双sgRNA敲除。
赞一下 回复此楼
5楼2021-09-13 19:08:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

言宸儿

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sxrvd42 at 2021-09-13 09:13:13
描述的有点不清楚，敲掉20bp，是设计的两个靶点吗？这种精确敲除很难吧，要是单靶点一般还是以点突变和小InDEL为主，缺失的情况也有，就是较少，而且恰好是20bp的概率更小

感谢回复，您说的很对。但因为文献里写的有利用单靶点产生的缺失或插入有几十bp的，但给的图也有一两个产生几百到几千bp的，所以我们觉得有可能产生较长片段的敲除
赞一下 回复此楼
6楼2021-09-13 19:14:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

言宸儿

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 风中你我 at 2021-09-12 15:28:46
多做几次，多挑选几个

感谢回复~
回复此楼
7楼2021-09-13 19:15:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 言宸儿 的主题更新
71/1返回列表
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 【求调剂】293分环境工程求调剂材料/化工，服从调剂，抗压能力强！ +4 xiiiia 2026-03-04 4/200 2026-03-05 09:06 by oxidpl
[考研] 材料085601一志愿哈工大317 +3 压迫感行 2026-03-04 3/150 2026-03-05 09:04 by 斩魂滴兔子！
[考研] 复试调剂 +3 呼呼？~+123456 2026-03-05 5/250 2026-03-05 08:19 by ms629
[考研] 281电子信息求调剂 +4 jhtfeybgj 2026-03-02 8/400 2026-03-04 23:57 by xiadiyi
[考研] 一志愿武汉理工大学-085602-总分296分-求调剂 +7 紫川葡柚 2026-03-04 7/350 2026-03-04 21:04 by kakakapanpan
[考研] 301求调剂 +3 李LJR 2026-03-04 3/150 2026-03-04 16:15 by sslc1985
[考研] 本科太原理工采矿工程，求调剂 +3 onlx 2026-03-01 3/150 2026-03-04 15:57 by Stephen_ym
[考研] 0854总分272 +5 打小就是老实人 2026-03-02 6/300 2026-03-04 01:41 by ouhaiyu
[考研] 理学，工学，农学调剂，少走弯路，这里欢迎您！ +8 likeihood 2026-03-02 11/550 2026-03-03 19:39 by 一叶凡尘?
[考研] 江苏省农科院招调剂1名 +5 Qwertyuop 2026-03-01 5/250 2026-03-03 17:50 by 梅子鸭鸭
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业，申博 +4 更多的是 2026-02-27 5/250 2026-03-03 17:44 by wenium
[考研] 085602化学工程350，调剂，有没有211的 +5 利好利好. 2026-03-02 9/450 2026-03-03 17:06 by 利好利好.
[考研] 283求调剂 +9 鹿沫笙 2026-03-02 9/450 2026-03-03 15:58 by tgxtgxtgx9
[考研] 材料工程专硕283求调剂 5+8 ，！？ 2026-03-02 10/500 2026-03-03 12:01 by EBSD
[考研] 化学，材料，环境类求调剂 +7 考研版棒棒 2026-03-02 7/350 2026-03-02 19:56 by hypershenger
[考研] 材料085601调剂 +5 多多子. 2026-03-02 5/250 2026-03-02 19:15 by zhukairuo
[考研] 291 求调剂 +3 化工2026届毕业� 2026-03-02 3/150 2026-03-02 12:55 by houyaoxu
[考研] 264求调剂 +4 巴拉巴拉根556 2026-02-28 4/200 2026-03-02 10:48 by yuchj
[考研] 调剂 +3 13853210211 2026-03-02 4/200 2026-03-02 10:16 by 13853210211
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭