应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » CRISPR/Cas9敲除
71/1返回列表
查看: 1405  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者言宸儿将赠送您 10 个金币

言宸儿

新虫 (初入文坛)

[求助] CRISPR/Cas9敲除 已有1人参与

利用CRISPR/Cas9敲除某20bp的序列，不仅没敲掉却造成这20不怕序列中几个剪辑发生突变，并造成之后的序列频繁发生点突变是什么情况，有人了解可以赐教吗？

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2021-09-10 21:07:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

言宸儿

新虫 (初入文坛)
利用CRISPR/Cas9敲除某20bp的序列，不仅没敲掉却造成这20bp序列中几个碱基发生突变，并造成之后的序列频繁发生点突变是什么情况，有人了解可以赐教吗？
赞一下 回复此楼
2楼2021-09-10 21:21:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

风中你我

银虫 (小有名气)
多做几次，多挑选几个

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2021-09-12 15:28:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
本帖仅楼主可见
赞一下
4楼2021-09-13 09:13:13
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

言宸儿

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sxrvd42 at 2021-09-13 09:13:13
描述的有点不清楚，敲掉20bp，是设计的两个靶点吗？这种精确敲除很难吧，要是单靶点一般还是以点突变和小InDEL为主，缺失的情况也有，就是较少，而且恰好是20bp的概率更小

对的，靶向一个基因设计2个sgRNA，也是为了增加knock out的概率。有试过单靶点，但是在线虫内利用co-CRISPR进行敲除，筛选得到的F1代编辑体数量太少。所以更多用双sgRNA敲除。
赞一下 回复此楼
5楼2021-09-13 19:08:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

言宸儿

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by sxrvd42 at 2021-09-13 09:13:13
描述的有点不清楚，敲掉20bp，是设计的两个靶点吗？这种精确敲除很难吧，要是单靶点一般还是以点突变和小InDEL为主，缺失的情况也有，就是较少，而且恰好是20bp的概率更小

感谢回复，您说的很对。但因为文献里写的有利用单靶点产生的缺失或插入有几十bp的，但给的图也有一两个产生几百到几千bp的，所以我们觉得有可能产生较长片段的敲除
赞一下 回复此楼
6楼2021-09-13 19:14:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

言宸儿

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 风中你我 at 2021-09-12 15:28:46
多做几次，多挑选几个

感谢回复~
回复此楼
7楼2021-09-13 19:15:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 言宸儿 的主题更新
71/1返回列表
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 4/200 2026-09-01 01:30 by o3EMxHUAQDtS
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 EZ67DG6CvcKL 2026-08-31 3/150 2026-08-31 22:12 by o3EMxHUAQDtS
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 能否申诉？ +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 5/250 2026-08-31 14:40 by hahaboy
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭