24小时热门版块排行榜    

查看: 753  |  回复: 7
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

liluolove

[交流] 农杆菌电转的问题,急!!!!

构建了个载体,现在正在用电转法往农杆菌中转,就按照一般的操作流程做了两次了,涂板子却一个菌都不长,纳闷了。我用的农杆菌是LBA4404,培养基是YM,抗生素为rif+str+kan,这些都没什么问题。转化的时候质粒的量是5ul,农杆菌为25ul,电击完后迅速加了培养基。电击后参数为TC:4.9;Volts:2377.现在不知道问题出在那里,请各位虫友帮帮忙!谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liluolove

质粒不是连接转化完毕后直接提取的,没有溶解在水中。所有的操做都很小心,在超净工作台上,应该不会有其他杂质吧。
4楼2009-08-20 10:49:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

qiyaocheng

木虫 (小有名气)

老虫


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
质粒是水溶的吗,有没有引入其他离子之类的杂质啊
毕业回望科研路,满目疮痍一身土
2楼2009-08-20 10:24:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qiyaocheng

木虫 (小有名气)

老虫

还有,平时我们实验室做的时候都是用100ul的感受态,你的是不是太少了
毕业回望科研路,满目疮痍一身土
3楼2009-08-20 10:25:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lipishun

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+1,VIP+0):欢迎发帖交流! 8-20 22:15
质粒用去离子水溶解,电泳,定量后进行电转。质粒浓度不宜过高。不知道你们电击杯要求的最小容积是多少?我以前用的是50微升,参数设置时3000V,5ms。我以前的质粒是pCAMBIA1300系列,只用KAN平板就可以。
5楼2009-08-20 17:59:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085601求调剂总分293英一数二 +3 钢铁大炮 2026-03-24 3/150 2026-03-24 22:03 by bingxueer79
[考研] 340求调剂 +4 话梅糖111 2026-03-24 4/200 2026-03-24 21:41 by yuyu98412
[考研] 0854AI CV方向招收调剂 +3 章小鱼567 2026-03-23 3/150 2026-03-24 20:25 by 汪!?!
[考研] 材料学硕333求调剂 +3 北道巷 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:17 by pswait
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
[考研] 307求调剂 +5 超级伊昂大王 2026-03-24 5/250 2026-03-24 15:46 by 星空星月
[考研] 求调剂 +7 十三加油 2026-03-21 7/350 2026-03-23 23:48 by 热情沙漠
[考研] 一志愿陕师大生物学071000,298分,求调剂 +3 SYA! 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:09 by macy2011
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
[论文投稿] 急发核心期刊论文 +3 贤达问津 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:13 by 妹子不好惹
[考研] 328求调剂 +4 LHHL66 2026-03-23 4/200 2026-03-23 14:55 by lbsjt
[考研] 298求调剂 +8 上岸6666@ 2026-03-20 8/400 2026-03-23 11:02 by laoshidan
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
[考研] 311求调剂 +6 冬十三 2026-03-18 6/300 2026-03-22 20:18 by edmund7
[考研] 354求调剂 +7 Tyoumou 2026-03-18 10/500 2026-03-22 11:11 by 人来盛
[考研] 085600材料与化工306 +4 z1z2z3879 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:44 by ms629
[考研] 材料学学硕080502 337求调剂-一志愿华中科技大学 +4 顺顺顺mr 2026-03-18 5/250 2026-03-21 10:22 by luoyongfeng
[考研] 317求调剂 +5 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
[考研] 353求调剂 +3 拉钩不许变 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:56 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 @taotao 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:35 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见