24小时热门版块排行榜    

查看: 1198  |  回复: 4
【悬赏金币】回答本帖问题,作者早日上岸将赠送您 5 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

早日上岸

新虫 (小有名气)

[求助] EXPAR指数扩增的问题~各位多多帮忙 已有1人参与

为什么荧光定量结果表明没有扩增呢?
           我的靶引物和模板浓度为0.1μM,是不是有点低啊。体系为20μL
           还有就是模板的3端是否需要P修饰呢,我看有的文献修饰,有的没有。
  救救孩子吧
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

早日上岸

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2021-05-19 16:56:47
质粒模板么,浓度多高?

试剂是买的自己配,还是预混试剂直接用的?

不是质粒,就是自己设计合成的单链DNA,终浓度为0.1μM,试剂是自己混的
3楼2021-05-24 10:02:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
质粒模板么,浓度多高?

试剂是买的自己配,还是预混试剂直接用的?
行至水穷处,坐看云起时
2楼2021-05-19 16:56:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

如果是根据PNAS那篇文章里面提到的有: (1) nickase, (2)聚合酶, (3)引物或者靶标序列内含有切口没识别序列, (4)反应条件(buffer,尤其镁离子浓度, 盐浓度, pH值等), 一个个排除吧

自己混的试剂,没有对比试剂,摸索会麻烦一下,good luck!
行至水穷处,坐看云起时
4楼2021-05-25 09:07:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

早日上岸

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by pennchem at 2021-05-25 09:07:06
如果是根据PNAS那篇文章里面提到的有: (1) nickase, (2)聚合酶, (3)引物或者靶标序列内含有切口没识别序列, (4)反应条件(buffer,尤其镁离子浓度, 盐浓度, pH值等), 一个个排除吧

自己混的试剂,没有对比试剂,摸索 ...

谢谢~已经扩出来啦嘻嘻嘻
5楼2021-05-31 08:55:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 新疆大学地质与矿业工程学院招生 +5 another12 2026-03-04 7/350 2026-03-05 23:17 by fengyuling00
[考研] 考研282分求调剂,接受跨专业 +4 刘淄博 2026-03-04 7/350 2026-03-05 22:56 by 刘淄博
[考研] 材料调剂 +4 ounce. 2026-03-04 5/250 2026-03-05 20:10 by 黑衣馒头人
[考研] 0856材料与化工求调剂! +5 化工考生111 2026-03-04 9/450 2026-03-05 16:54 by zhukairuo
[考研] 一志愿清华深研院材料专硕294分,专业课111分,本科中南大学材料,有六级,有工作经验 +3 H14528 2026-03-04 3/150 2026-03-05 10:35 by ms629
[考研] 281电子信息求调剂 +5 jhtfeybgj 2026-03-02 9/450 2026-03-05 09:36 by 085400调剂党
[考研] 求调剂院校 +6 云朵452 2026-03-02 12/600 2026-03-04 23:17 by 云朵452
[考研] 292求调剂 +9 yhk_819 2026-02-28 9/450 2026-03-04 16:06 by sslc1985
[考研] 一志愿西工大材料学,英一数二总分321分,求调剂。 +3 zz05zz 2026-03-02 5/250 2026-03-04 09:16 by lbsjt
[论文投稿] EST拒稿重投 5+3 15102603076 2026-03-02 3/150 2026-03-04 00:51 by bobvan
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业,申博 +4 更多的是 2026-02-27 5/250 2026-03-03 17:44 by wenium
[考研] 292求调剂 +3 sgbl 2026-03-03 3/150 2026-03-03 17:30 by barlinike
[考研] 化学0703求调剂 学硕 理/工科均可 总分279 +3 1一11 2026-03-03 5/250 2026-03-03 12:37 by 1一11
[考研] 298求调剂 +10 人间唯你是清欢 2026-02-28 14/700 2026-03-02 22:49 by 人间唯你是清欢
[考研] 290分材料工程085601求调剂 数二英一 +8 llx0610 2026-03-02 9/450 2026-03-02 22:09 by 无际的草原
[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +5 虫虫虫虫虫7 2026-03-01 9/450 2026-03-02 21:33 by sunny81
[考研] 求调剂 +7 repeatt?t 2026-02-28 7/350 2026-03-02 20:34 by hypershenger
[考研] 材料284求调剂,一志愿郑州大学英一数二专硕 +15 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 15/750 2026-03-02 20:13 by hypershenger
[基金申请] 成果系统访问量大,请一小时后再尝试。---NSFC啥时候好哦,已经两天这样了 +4 NSFC2026我来了 2026-02-28 4/200 2026-03-01 22:37 by 铁门栓
[考研] 304求调剂 +3 52hz~~ 2026-02-28 5/250 2026-03-01 00:00 by 52hz~~
信息提示
请填处理意见