应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » EXPAR指数扩增的问题~各位多多帮忙
51/1返回列表
查看: 1197  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者早日上岸将赠送您 5 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

早日上岸

新虫 (小有名气)

[求助] EXPAR指数扩增的问题~各位多多帮忙 已有1人参与

为什么荧光定量结果表明没有扩增呢？
           我的靶引物和模板浓度为0.1μM，是不是有点低啊。体系为20μL
           还有就是模板的3端是否需要P修饰呢，我看有的文献修饰，有的没有。
  救救孩子吧
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2021-05-19 15:57:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

如果是根据PNAS那篇文章里面提到的有: (1) nickase, (2)聚合酶, (3)引物或者靶标序列内含有切口没识别序列, (4)反应条件(buffer,尤其镁离子浓度, 盐浓度, pH值等), 一个个排除吧

自己混的试剂,没有对比试剂,摸索会麻烦一下,good luck!
赞一下(1人) 回复此楼
行至水穷处，坐看云起时
4楼2021-05-25 09:07:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
质粒模板么，浓度多高？

试剂是买的自己配，还是预混试剂直接用的？
赞一下 回复此楼
行至水穷处，坐看云起时
2楼2021-05-19 16:56:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

早日上岸

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2021-05-19 16:56:47
质粒模板么，浓度多高？

试剂是买的自己配，还是预混试剂直接用的？

不是质粒，就是自己设计合成的单链DNA，终浓度为0.1μM，试剂是自己混的
赞一下 回复此楼
3楼2021-05-24 10:02:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

早日上岸

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by pennchem at 2021-05-25 09:07:06
如果是根据PNAS那篇文章里面提到的有: (1) nickase, (2)聚合酶, (3)引物或者靶标序列内含有切口没识别序列, (4)反应条件(buffer,尤其镁离子浓度, 盐浓度, pH值等), 一个个排除吧

自己混的试剂,没有对比试剂,摸索 ...

谢谢~已经扩出来啦嘻嘻嘻
赞一下 回复此楼
5楼2021-05-31 08:55:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 接收调剂 +19 津萌津萌 2026-03-02 29/1450 2026-03-05 19:27 by mzssj
[考研] 材料学硕318求调剂 +19 February_Feb 2026-03-01 21/1050 2026-03-05 17:18 by yfcxmc
[考研] 302材料工程求调剂 +7 Doleres 2026-03-01 8/400 2026-03-05 09:59 by oxidpl
[考研] 0856材料求调剂 +17 hyf hyf hyf 2026-02-28 18/900 2026-03-05 09:32 by oxidpl
[考研] 0856材料与化工，270求调剂 +17 YXCT 2026-03-01 20/1000 2026-03-05 09:22 by 一切OK
[考研] 0703化学求调剂，总分320分，一志愿中南民族大学 +3 19286712440 2026-03-04 3/150 2026-03-04 18:30 by houyaoxu
[考研] 0855机械工程324求调剂 +3 郑SK 2026-03-02 7/350 2026-03-04 17:24 by congmingdou
[考研] 材料专硕346求调剂 +3 旺一下 2026-03-04 3/150 2026-03-04 16:26 by sslc1985
[考研] 281求调剂 +3 Y?l?h 2026-03-04 3/150 2026-03-04 10:51 by 汪！？！
[考研] 0703化学学硕 288分 +4 旅行中的紫葡萄 2026-03-03 4/200 2026-03-03 23:41 by ch1979
[考研] 0703 总分319求调剂 +4 Xinyuu 2026-03-02 4/200 2026-03-03 22:58 by 让我们一起快乐
[考研] 085700资环求调剂，初始279，六级已过，英语能力强 +3 085700资环调剂 2026-03-03 4/200 2026-03-03 19:10 by lature00
[考研] 271求调剂 +4 Ricardo1113 2026-03-02 4/200 2026-03-03 08:00 by 无际的草原
[考研] 290分材料工程085601求调剂 数二英一 +8 llx0610 2026-03-02 9/450 2026-03-02 22:09 by 无际的草原
[考研] 285求调剂 +9 满头大汗的学生 2026-02-28 9/450 2026-03-02 20:29 by hypershenger
[考研] 272求调剂 +9 材紫有化 2026-02-28 9/450 2026-03-02 20:22 by hypershenger
[考研] 一志愿郑大材料学硕298分，求调剂 +6 wsl111 2026-03-01 6/300 2026-03-02 11:00 by ydudjddnd
[考研] 322求调剂 +3 熊境喆 2026-03-01 3/150 2026-03-02 08:44 by houyaoxu
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
[考研] 311求调剂 +9 南迦720 2026-02-28 10/500 2026-03-01 10:55 by sunny81
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭