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qift

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教拟南芥转化后阳性苗筛选的问题 已有1人参与

做的拟南芥花序浸染法转化实验研究启动子的活性,用的载体是pCAMbia 1301,看了载体图谱发现同时具备潮霉素抗性和卡那抗性,请问是用潮霉素筛选阳性株系还是用卡那霉素,还是两种都可以呢,如果用潮霉素,想问下浓度是多少,看文献发现有25mg/L-50mg/L不等,并且在阳性苗区分上写的很笼统,通过发育阶段来划分,有没有朋友做过有详细一点的步骤呢,感激不尽,第一次做拟南芥转化的实验,没有经验,谢谢大家了
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longanzz

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
还是植物好: 金币+5, 积极应助 2021-05-26 09:58:38
你看一下载体图谱。 菌液用卡那抗性筛选,转基因植物用潮霉素筛选。前期要做预实验,看看多大的浓度可以使不转基因的拟南芥死掉。一般情况下,加上潮霉素,假阳性的植物都会死掉,阳性的一直保持绿色,如果潮霉素浓度过高的话,阳性植株在平板上不容易生根,要转移到基质里面慢慢生根。
2楼2021-05-26 08:12:47
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佰奥维欧

禁虫 (初入文坛)

还是植物好: 屏蔽内容, 请不要在本版面发布广告类帖子 2021-11-09 10:54:30
本帖内容被屏蔽

3楼2021-11-08 14:26:42
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佰奥维欧

禁虫 (初入文坛)

还是植物好: 屏蔽内容, 请您私信,不要在本版面发广告类帖子,感谢您的理解。 2021-12-05 17:51:36
本帖内容被屏蔽

4楼2021-12-01 11:15:21
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