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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 实验技术 » 请教拟南芥转化后阳性苗筛选的问题
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qift

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教拟南芥转化后阳性苗筛选的问题 已有1人参与

做的拟南芥花序浸染法转化实验研究启动子的活性，用的载体是pCAMbia 1301，看了载体图谱发现同时具备潮霉素抗性和卡那抗性，请问是用潮霉素筛选阳性株系还是用卡那霉素，还是两种都可以呢，如果用潮霉素，想问下浓度是多少，看文献发现有25mg/L-50mg/L不等，并且在阳性苗区分上写的很笼统，通过发育阶段来划分，有没有朋友做过有详细一点的步骤呢，感激不尽，第一次做拟南芥转化的实验，没有经验，谢谢大家了
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1楼 2021-05-14 23:01:25
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佰奥维欧

禁虫 (初入文坛)
还是植物好: 屏蔽内容, 请您私信，不要在本版面发广告类帖子，感谢您的理解。 2021-12-05 17:51:36
本帖内容被屏蔽
4楼2021-12-01 11:15:21
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longanzz

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
还是植物好: 金币+5, 积极应助 2021-05-26 09:58:38
你看一下载体图谱。 菌液用卡那抗性筛选，转基因植物用潮霉素筛选。前期要做预实验，看看多大的浓度可以使不转基因的拟南芥死掉。一般情况下，加上潮霉素，假阳性的植物都会死掉，阳性的一直保持绿色，如果潮霉素浓度过高的话，阳性植株在平板上不容易生根，要转移到基质里面慢慢生根。
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2楼2021-05-26 08:12:47
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