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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 求助结晶紫染色法测定细菌生物膜具体步骤
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芒果草莓96

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助结晶紫染色法测定细菌生物膜具体步骤已有1人参与

刚刚接触细菌生物膜的新手求助具体步骤(菌株是蜡样芽胞杆菌)：
1 100微升培养液接种10微升菌液，37℃静置培养24h；
2 吸出培养液，加入200微升PBS洗涤3次（每次都会吸出浑浊的物质，是生物膜吗？怎样才能避免破坏膜呢？）；
3 100微升甲醇固定15min，吸出甲醇；
4 100微升结晶紫溶液染色（结晶紫溶液到底应该用多大的浓度，有1%和0.1%的浓度，该选哪个？染色要多久？有文献说5min还有说15min。）
5 100微升95%乙醇脱色（脱色时间要多久？）
6 测OD值（到底测590nm还是595nm还是540nm?）
测OD590时，酶标仪结果还出了星号咋回事，新手刚刚接触生物膜，啥也不懂，求大神指教！
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1楼2021-04-10 20:06:04
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杳杳素衣～

新虫 (初入文坛)
您好，请问现在问题解决了吗，我在养大肠杆菌的生物膜，也遇到了类似的问题，方便请教吗

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2楼2021-05-07 10:27:17
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芒果草莓96

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 杳杳素衣～ at 2021-05-07 10:27:17
您好，请问现在问题解决了吗，我在养大肠杆菌的生物膜，也遇到了类似的问题，方便请教吗

不好意思，太久没上线回复迟了，现在问题还是没有解决，我们可以沟通一下
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3楼2021-07-03 08:37:53
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药化荆棘鸟

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 芒果草莓96 at 2021-07-03 08:37:53
不好意思，太久没上线回复迟了，现在问题还是没有解决，我们可以沟通一下...

可以加联系方式沟通一下吗，我也在做生物膜

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4楼2021-08-30 18:50:32
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ObieSoul

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 药化荆棘鸟 at 2021-08-30 18:50:32
可以加联系方式沟通一下吗，我也在做生物膜
...

加联系方式吗？？我也想请教一下
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5楼2021-09-02 17:23:42
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312926

新虫 (初入文坛)
我这边正好看到一篇硕士毕业论文，污水处理厂中微塑料表面的生物膜与抗生素基因特征研究，其中就是用结晶紫染色法测生物膜量，建议你看一下文献，问问作者
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6楼2021-09-15 21:43:29
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器识其先

新虫 (初入文坛)
请问楼主，生物膜测定之后准备做什么深入研究吗……我也是做这个实验来着，做完之后就不知道该继续做些什么了

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7楼2021-10-25 08:22:18
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1142341745CL

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 312926 at 2021-09-15 21:43:29
我这边正好看到一篇硕士毕业论文，污水处理厂中微塑料表面的生物膜与抗生素基因特征研究，其中就是用结晶紫染色法测生物膜量，建议你看一下文献，问问作者

您好，那篇论文的题目方便发一下么

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8楼2022-06-14 11:35:47
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hizifu

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 药化荆棘鸟 at 2021-08-30 18:50:32
可以加联系方式沟通一下吗，我也在做生物膜
...

我也遇到同样的问题，是不是PBS把菌都洗没了，加q交流下1924806089

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9楼2023-03-06 10:08:40
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