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[求助]
求助结晶紫染色法测定细菌生物膜具体步骤已有1人参与
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刚刚接触细菌生物膜的新手求助具体步骤(菌株是蜡样芽胞杆菌): 1 100微升培养液接种10微升菌液,37℃静置培养24h; 2 吸出培养液,加入200微升PBS洗涤3次(每次都会吸出浑浊的物质,是生物膜吗?怎样才能避免破坏膜呢?); 3 100微升甲醇固定15min,吸出甲醇; 4 100微升结晶紫溶液染色(结晶紫溶液到底应该用多大的浓度,有1%和0.1%的浓度,该选哪个?染色要多久?有文献说5min还有说15min。) 5 100微升95%乙醇脱色(脱色时间要多久?) 6 测OD值(到底测590nm还是595nm还是540nm?) 测OD590时,酶标仪结果还出了星号咋回事,新手刚刚接触生物膜,啥也不懂,求大神指教! |
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hizifu
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