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芒果草莓96

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助结晶紫染色法测定细菌生物膜具体步骤 已有1人参与

刚刚接触细菌生物膜的新手求助具体步骤(菌株是蜡样芽胞杆菌):
1 100微升培养液接种10微升菌液,37℃静置培养24h;
2 吸出培养液,加入200微升PBS洗涤3次(每次都会吸出浑浊的物质,是生物膜吗?怎样才能避免破坏膜呢?);
3 100微升甲醇固定15min,吸出甲醇;
4 100微升结晶紫溶液染色(结晶紫溶液到底应该用多大的浓度,有1%和0.1%的浓度,该选哪个?染色要多久?有文献说5min还有说15min。)
5 100微升95%乙醇脱色(脱色时间要多久?)
6 测OD值(到底测590nm还是595nm还是540nm?)
测OD590时,酶标仪结果还出了星号咋回事,新手刚刚接触生物膜,啥也不懂,求大神指教!
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hizifu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 药化荆棘鸟 at 2021-08-30 18:50:32
可以加联系方式沟通一下吗,我也在做生物膜
...

我也遇到同样的问题,是不是PBS把菌都洗没了,加q交流下1924806089

发自小木虫IOS客户端
9楼2023-03-06 10:08:40
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杳杳素衣~

新虫 (初入文坛)

您好,请问现在问题解决了吗,我在养大肠杆菌的生物膜,也遇到了类似的问题,方便请教吗

发自小木虫Android客户端
2楼2021-05-07 10:27:17
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芒果草莓96

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 杳杳素衣~ at 2021-05-07 10:27:17
您好,请问现在问题解决了吗,我在养大肠杆菌的生物膜,也遇到了类似的问题,方便请教吗

不好意思,太久没上线回复迟了,现在问题还是没有解决,我们可以沟通一下
3楼2021-07-03 08:37:53
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药化荆棘鸟

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 芒果草莓96 at 2021-07-03 08:37:53
不好意思,太久没上线回复迟了,现在问题还是没有解决,我们可以沟通一下...

可以加联系方式沟通一下吗,我也在做生物膜

发自小木虫Android客户端
4楼2021-08-30 18:50:32
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