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[求助]
求助结晶紫染色法测定细菌生物膜具体步骤已有1人参与
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刚刚接触细菌生物膜的新手求助具体步骤(菌株是蜡样芽胞杆菌)： 1 100微升培养液接种10微升菌液，37℃静置培养24h； 2 吸出培养液，加入200微升PBS洗涤3次（每次都会吸出浑浊的物质，是生物膜吗？怎样才能避免破坏膜呢？）； 3 100微升甲醇固定15min，吸出甲醇； 4 100微升结晶紫溶液染色（结晶紫溶液到底应该用多大的浓度，有1%和0.1%的浓度，该选哪个？染色要多久？有文献说5min还有说15min。） 5 100微升95%乙醇脱色（脱色时间要多久？） 6 测OD值（到底测590nm还是595nm还是540nm?） 测OD590时，酶标仪结果还出了星号咋回事，新手刚刚接触生物膜，啥也不懂，求大神指教！ |
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