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【资料】各种培养基配法(102种)
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1.营养肉汤 成分:蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠5g,蒸馏水1000mL,pH7.4。 制法:按上述成分混合,溶解后校正pH,121℃高压灭菌15min。 2.营养琼脂培养基 成分:蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠5g,琼脂17g,蒸馏水1000mL,pH7.2。 制法:将除琼脂外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH,加入琼脂,分装于烧瓶内,121℃,15min高压灭菌备用。 3.MRS培养基 成分:蛋白胨10g,牛肉膏10g,酵母粉5g,K2HPO4 2g,柠檬酸二铵2g,乙酸钠5g,葡萄糖20g,吐温80 1mL,MgSO4 .7H2O 0.58g,MnSO4 4H2O 0.25g,(琼脂15~20g),蒸馏水1000mL。 制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至6.2~6.4,分装于三角瓶中,121℃,灭菌15min。 4.脱脂乳培养基 成分:牛奶,蒸馏水。 制法:将适量的牛奶加热煮沸20~30min,过夜冷却,脂肪即可上浮。除去上层乳脂即得脱脂乳。将脱脂乳盛在试管及三角瓶中,封口后置于灭菌锅中在108℃条件下蒸汽灭菌10~15min,即得脱脂乳培养基。 5.培养基A 成分:蛋白胨10.0g,酵母提取物1.0g,葡萄糖10.0g,NaCL5.0g,琼脂15.0g,水1000mL。制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至7.0~7.2,分装于三角瓶中,121℃,灭菌15min。 6.PTYG培养基 成分:胰胨Tryptone(Oxoid)5g,大豆蛋白胨5g,酵母粉(Oxoid)10g,葡萄糖10g,吐温80 0 1mL,琼脂15~20g,L-半胱氨酸盐酸盐0.05g,盐溶液4mL。 制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至6.8~7.0,分装于三角瓶中,115℃灭菌30min。 盐溶液制备:无水氯化钙0.2g,K2HPO4 1.0g,KH2PO4 1.0g,MgSO4 。7H2O 0.48g,NaCO3 10g,NaCL 2g,蒸馏水1000mL,溶解后备用。 7.豆芽汁液体培养基 成分:豆芽汁10mL,磷酸氢二铵1g,KCL 0.2g,MgSO4.7H2O 0.2g,琼脂20g。 制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至6.2~6.4,分装于三角瓶中,0.04%的溴甲酚紫酒精溶液(黄色5.2~6.8紫色)作为指示剂,115℃灭菌20min。 豆芽汁制备:将黄豆芽或绿豆芽200g洗净,在1000mL中煮沸30 min,纱布过滤得豆芽汁、补足水分至1000mL。 8.麦芽汁琼脂培养基 成分:优质大麦或小麦,蒸馏水,碘液。 制法:取优质大麦或小麦若干,浸泡6~12h,置于深约2cm的木盘上摊平,上盖纱布,每日早、中、晚各淋水一次,麦根伸长至麦粒两倍时,停止发芽晾干或烘干。 称取300g麦芽磨碎,加1000mL水,38℃保温2h,再升温至45℃,30min,再提高到50℃,30min,再升至60℃,糖化1~1.5h。 取糖化液少许,加碘液1~2滴,如不为蓝色,说明糖化完毕,用文火煮半小时,四层纱布过滤。如滤液不清,可用一个鸡蛋清加水约20mL调匀,打至起沫,倒入糖化液中搅拌煮沸再过滤,即可得澄清麦芽汁。用波美计检测糖化液浓度,加水稀释至10倍,调pH5~6,用于酵母菌培养;稀释至5~6倍,调pH7.2,可用于培养细菌,121℃灭菌20min。 9.查(察)氏培养基 成分:NaNO3 2g,K2HPO4 1g,MgSO4. 7H2O 0.5g,KCL 0.5g,FeSO4.7H2O 0.01g,蔗糖30g,琼脂15~20g,蒸馏水1000mL,pH值自然。 制法:加热溶解,分装后121℃灭菌20min。 10.马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA) 成分:马铃薯(去皮)200g,葡萄糖(或蔗糖)20g,琼脂20g,水1000mL。 制法:pH值自然。将马铃薯去皮、洗净、切成小块,称取200g加入1000mL蒸馏水,煮沸20min,用纱布过滤,滤液补足水至1000mL,再加入糖和琼脂,溶化后分装,121℃灭菌20min。另外,用少量乙醇溶解0.1g氯霉素,加入1000mL培养基中,分装灭菌后可用于食品中霉菌和酵母菌计数、分离。 11.PY基础培养基 成分:蛋白胨0.5g,酵母提取物1.0g,胰酶解酪胨 (Trypticase) 0.5g,盐溶液Ⅱ 4.0mL,蒸馏水1000mL。 盐溶液Ⅱ成分:CaCL2 0.2g,MgSO4.7H2O 0.48g,K2HPO4 1.0g,KH2PO4 1.0g,NaHCO3 10.0g,NaCL 2.0g,蒸馏水1000mL。 制法:加热溶解,分装后121℃灭菌20min。 12.甘露醇琼脂培养基(MSA) 成分:牛肉浸膏1g,月示胨NO.3(Difco)10g,D-甘露醇10g,NaCL 75g,琼脂约13g,酚红0.025g,水1000mL,pH7.2~7.6 制法:按量将各成分(酚红除外)混合,加热使完全溶解,调pH至7.4±0.2。加1%的酚红溶液2.5mL,混匀。121℃高压灭菌15min 13.高氏一号(淀粉琼脂)培养基(主用于放线菌、霉菌培养) 可溶性淀粉20g,KNO3 1g,NaCL 0.5g,K2HPO4 0.5g,MgSO4.7H2O 0.5g,FeSO4.7H2O 0.01g,琼脂20g,蒸馏水1000mL,pH7.2~7.4,121℃灭菌20min。 14.淀粉铵盐培养基 (主要用于霉菌、放线菌培养) 可溶性淀粉10g,(NH4)2SO4 2g,K2HPO4 lg,MgSO4.H2O lg,NaCL 1g,CaCO3 3g,蒸馏水1000mL,pH7.2~7.4,121℃灭菌20min。若加入15~20g琼脂即成固体培养基。 15.麦氏培养基(醋酸钠琼脂培养基) 葡萄糖1.0g,KCL 1.8g,酵母汁2.5g,醋酸钠8.2g,琼脂15g,蒸馏水1000mL,pH自然,0.7kg/cm2灭菌30min。 16.高盐察氏培养基(用于霉菌和酵母菌计数、分离用) 硝酸钠2g,磷酸二氢钾1g,硫酸镁(MgSO4 7H2O)0.5g,氯化钾 0.5g,硫酸亚铁0.01g,氯化钠60g,蔗糖30g,琼脂20g,蒸馏水1000mL,115℃灭菌30min。 注:①分离食品和饮料中的霉菌和酵母可选用马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基和/或孟加拉红培养基。②分离粮食中的霉菌可用高盐察氏培养基。 17.糖、醇类发酵基础培养基 (1)一般细菌常以休和利夫森二氏培养基 蛋白胨5g,NaCL 5g,K2HPO4 0.2g,糖醇(葡萄糖或其它糖、醇)10g,琼脂5~6g,1%溴甲酚紫(溴百里香草酚蓝)3mL,蒸馏水1000mL,pH7.0~7.2,分装试管,培养基高度约4.5cm,115℃灭菌20min。 (2)芽孢菌培养基 (NH4)2HPO4 1.0g,KCL 0.2g,MgSO4.7H2O 0.2g,酵母膏0.2g,琼脂5~6g,糖或醇类10.0g,蒸馏水1000mL,溴甲酚紫(0.04%)15mL,pH7.0~7.2,分装试管,培养基高度约4~5cm,112℃灭菌30min。 (3)乳酸菌培养基 蛋白胨5g,牛肉膏5g,酵母膏5g,吐温80(Tween 80)0.5mL,糖或醇10g,琼脂5~6 g,蒸馏水(自来水)1000mL,加入1.6%溴甲酚紫溶液约1.4mL。以上调pH6.8~7.0,分装试管,112℃灭菌30min。 18.硝酸盐培养基(硝酸盐还原试验用) 蛋白胨5.0g,KNO3 0.2g, 蒸馏水1000 mL,pH7.4,每管分装4~5mL,121℃灭菌15~20min。 吲哚实验培养基:1%胰蛋白胨,调pH7.2~7.6,分装1/3~1/4试管,115℃灭菌30min。 19.硫化氢试验(纸条法)培养基 蛋白胨10g,NaCL 5g,牛肉膏10g,半胱氨酸0.5g,蒸馏水1000mL,pH7.0~7.4,分装试管,每管液层高度4~5cm,112℃灭菌20~30min。另外将普通滤纸剪成0.5~1cm宽的纸条,长度根据试管与培养基高度而定。用5%~10%的醋酸铅将纸条浸透,然后用烘箱烘干,放于培养皿中灭菌备用。 20.尿素培养基(尿酶试验) 成分:蛋白胨1.0g,葡萄糖1.0g,NaCL 5.0g,KH2PO4 2.0 g,0.4%酚红3.0mL,琼脂20.0g,20%尿素100.0mL,pH7.1~7.4。 制法:将除尿素和琼脂以外的成分配好,并校正pH值,加入琼脂,加热熔化并分装于三角瓶,121℃灭菌15min,冷却至50~55℃,加入过滤除菌的尿素溶液,分装于灭菌试管内,摆成琼脂斜面备用。 21.氮源利用基础培养基 KH2PO4 1.36g,NaH2PO4 2.13g,MgSO4 7H2O 0.2g,FeSO4.7H2O 0.2g,CaCL2 0.5g,葡萄糖10.0g,蒸馏水1000mL。 将需要测定的氨基酸、氨态氮(如磷酸氢二氨)、硝态氮(如硝酸钾)加入到上述基础培养基中,使其终浓度为0.05~0.1%,如测定菌不能利用葡萄糖为碳源,可用其它碳源代替(终浓度为0.2~0.5%),另做一份不加氮源的空白对照,调pH7.0~7.2,分装于试管,每管4~5mL,112℃灭菌20~30min,制备出的培养基要求无沉淀。 22.甲基红培养基(M.R及V-P试验用) 蛋白胨7.0g,葡萄糖5.0g,K2HPO4(或NaCL)5g,水1000mL,pH7.0~7.2,每管分装4~5mL,115℃灭菌30min。 23.动力、靛基质、尿素(MIU)综合培养基 (用于检验细菌运动性、吲哚、尿素酶用) 蛋白胨(含色氨酸)30 g,KH2PO4 2g、NaCL 5g、琼脂3 g、0.2%酚红酒精溶液2mL、尿素20g、蒸馏水1000mL。分装于小试管,112℃灭菌15min,灭菌后液体应呈淡黄色。 24.半固体培养基(用于细菌的动力试验) 牛肉膏5.0g,蛋白胨10.0g,琼脂3~5g,蒸馏水1000mL,pH7.2~7.4,熔化后分装试管(8mL)121℃灭菌15min,取出直立试管待凝固。 25.M17琼脂培养基(分离、培养乳球菌等的选择培养基) 植物蛋白胨5g,酵母粉5g,聚蛋白胨5g,抗坏血酸0.5g,牛肉膏2.5g,MgSO4 7H2O 0.01g,ß-甘油磷酸二钠19g,蒸馏水1000mL,121℃灭菌15min。 26.蛋白胨水溶液(靛基质试验用) 蛋白胨20.0g,NaCL 5.0g,蒸馏水1000mL,pH7.4,121℃灭菌15min。 27.精氨酸双水解酶实验培养基 成分:蛋白胨1g,氯化钠5g,K2HPO4 0.3g,L-精氨酸10g,琼脂10g,酚红0.01g,蒸馏水1000mL。 制法:除酚红外,将以上各成分溶解,调节pH7.0~7.2,加入指示剂,分装试管,培养基高约4~5cm,121℃灭菌20min备用。 28.葡萄糖氧化发酵培养基 成分:蛋白胨2g,氯化钠5g,1%溴百里酚蓝水溶液3mL,琼脂5~6g,K2HPO4 0.2g,葡萄糖1%,蒸馏水1000mL。 制法:除溴百里酚蓝外,溶解以上各成分,调节pH值为6.8~7.0,分装试管,用115℃灭菌20min备用。 29.假单胞菌选择培养基(PSA) 基础成分:多价胨16g,水解酪蛋白10g,硫酸钾10g,氯化镁1.4g,琼脂11g,甘油10mL,蒸馏水1000mL,pH7.1±0.2。 CFC选择添加物:溴化十六烷基三甲胺10mg/L,梭链孢酸钠10mg/L,头孢菌素50mg/L。 制法:先将基础成分加热煮沸使之完全溶解,121℃,15min条件下灭菌。冷却到50℃备用。当基础培养基冷却到50℃后加入溶解后过滤除菌的CFC补充物,完全混合后倒平板备用。 30.乳糖胆盐发酵培养基 成分:蛋白胨20g,猪胆盐(或牛、羊胆盐)5g,乳糖10g,0.04%溴甲酚紫水溶液25mL,蒸馏水1000mL,pH7.4。 制法:将蛋白胨、胆盐及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,分装每管10mL,并放入一个小倒管,115℃,15min高压灭菌. 注:双料乳糖胆盐培养基除蒸馏水外,其他成分加倍。 31.伊红美兰琼脂培养基 成分:蛋白胨20g,乳糖10g,磷酸氢二钾2g,琼脂17g,2%伊红Y溶液20mL,0.65%美兰溶液10mL,蒸馏水1000mL,pH7.1。 制法:将蛋白胨、磷酸氢二钾和琼脂溶解于蒸馏水中,校正pH,分装于烧瓶内,高压灭菌121℃,15min备用。 临用时,加入乳糖,并加热溶化琼脂,冷至50~55℃,加入伊红和美兰溶液,摇匀,倾注平板。 32.乳糖发酵培养基 成分:蛋白胨20g,乳糖10g,0.04%溴甲酚紫水溶液25mL,蒸馏水1000mL,pH7.4。 制法:将蛋白胨、乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,按检验要求分装30mL、10mL或3mL,并放入一个小倒管,115℃,15min高压灭菌。 33.胰酪胨大豆肉汤 成分:胰酪胨(或胰蛋白胨)17g,植物蛋白胨(或大豆蛋白胨)3g,氯化钠100g,磷酸氢二钾2.5g,葡萄糖2.5g,蒸馏水1000mL。 制法:将上述成分混合,加热并轻轻搅拌溶液,分装后121℃15min高压灭菌。最终pH7.3±0.2。 34.7.5%氯化钠肉汤 成分:蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠75g,蒸馏水1000mL,pH7.4。 制法:将上述成分加热溶解,校正pH,分装试管,121℃15min高压灭菌。 35.豆粉琼脂 成分:牛心消化汤1000mL,琼脂20g,黄豆粉浸液50mL,pH 7.4~7.6。 制法:将琼脂加在牛心消化汤中,加热溶解,过滤。加入黄豆粉浸液,分装每瓶100mL,121℃15min高压灭菌。 36.血琼脂平板 成分:豆粉琼脂100mL,脱纤维羊血(或兔血)5~10mL。 制法:加热融化琼脂,冷至50℃,以无菌操作加入脱纤维羊血或兔血,摇匀,倾注平板。或分装灭菌试管,摆成斜面。 37.aird-Parker氏琼脂平板 成分:胰蛋白胨10g,牛肉膏5g,酵母膏1g,丙酮酸钠10g,甘氨酸12g,氯化锂(LiCL•6H2O)5g,琼脂20g,蒸馏水950mL,pH7.5。 增菌剂的配法:30~50%卵黄盐水50mL与除菌过滤的1%亚碲酸钾溶液10mL混合,保存在冰箱内。 制法:将各成分加到蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解。冷至25℃,矫正pH。分装每瓶95mL,121℃高压灭菌15min。临用时,加热融化琼脂,冷至50℃,每95mL加入预热至50℃的卵黄-亚碲酸钾增菌剂5mL,摇匀后倾注平板。培养基应是致密不透明的。使用前在冰箱储存不得超过48h。 38.肉浸液 成分:绞碎牛肉500g,氯化钠5g,蛋白胨10g,磷酸氢二钾2g,蒸馏水1000mL,pH 7.4~7.6。 制法:将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g,混合后放冰箱24h,除去液面之浮油,隔水煮沸半小时,使肉渣完全凝结成块,用绒布过滤,并挤压收集全部滤液,加水补足原量。加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐,溶解后矫正pH7.4~7.6煮沸并过滤,分装烧瓶,121℃,30min高压灭菌。 39.兔血浆 成分:柠檬酸钠0.106 mol/L(31.3g Na3C6H5O7•2H2O溶于1L蒸馏水中) 制法:一份加兔血9份混合后离心2000rpm,10min吸取上清液即为兔血浆。 40.肠毒素产毒培养基 成分:蛋白胨20g,胰消化酪蛋白200mg,氯化钠5g,磷酸二氢钾1g,氯化钙0.1g,硫酸镁0.2g,菸酸0.01g,蒸馏水1000mL,琼脂10~12g(固体透析培养用),pH7.2~7.4。 由于太多我就先发一部分,有兴趣的同学可以下载。 资料来源:http://www.yiqi120.com/zlzx.asp · [ Last edited by silicare on 2012-11-5 at 08:29 ] |
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2011-12-02 16:11
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blww122147楼
2011-12-06 14:25
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holite49楼
2012-01-11 00:40
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了夕50楼
2012-02-03 15:44
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气定神清
