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银虫 (小有名气)

[交流] 包涵体变性复性已有5人参与

我现在在做镍柱亲和层析，小量纯化，但是目的带在包涵体中表达，我是先将包涵体变性，纯化后再复性，还是变性复性后再纯化呢?能告诉一些具体的方法吗？

[ Last edited by 350784478 on 2009-8-4 at 15:17 ]

做个有风度的人

1楼 2009-07-27 10:18:20

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银虫 (小有名气)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

引用回帖:

Originally posted by HarveyWang at 2009-08-04 09:46:51:
都可以，这要自己摸索。

包涵体变性后上NI柱，能挂柱的最好，洗脱后有很单一的条带，有助于复性。

我就是把包涵体变性以后上NI柱的，但是柱子挂住的蛋白几乎很少，为什么呢？
我都让柱子和蛋白孵育过夜了，流出液里还是有很多蛋白，我是用8M的尿素变性的，我在降低尿素浓度的时候蛋白就会随着尿素流下来很郁闷是为什么
麻烦高手指教！在

下不胜感激

8楼2010-06-02 10:50:25

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