应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸杂交 » 预期的链置换信号放大反应没有发生
51/1返回列表
查看: 1077  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者小艺ss将赠送您 23 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

小艺ss

新虫 (初入文坛)

[求助] 预期的链置换信号放大反应没有发生 已有1人参与

求助各位大佬，本人在做分子信标识别（MB）和信号放大方面的工作，T是靶标核酸链，B是理论上能将与MB结合的T替换下来，游离的T再次与MB反应，以实现T的量放大的效果。具体步骤如下：
1、MB探针溶于缓冲溶液（10mM Tris-HCl，2mM EDTA，5mM MgCl2），95℃加热5min，缓慢冷却至4℃，得到发夹状MB。B直接溶于缓冲溶液备用（10mM Tris-HCl，2mM EDTA）。
2、取MB于PBS溶液中，37℃孵育30min。测定荧光强度记作F0。
3、取MB和T适量于PBS溶液中，37℃孵育30min。测定荧光强度记作F1。
4、取MB和B适量于PBS溶液中，37℃孵育30min。测定荧光强度记作F2。
5、取MB和T适量于PBS溶液中，37℃孵育30min。取出，加入B探针，37℃孵育30min。测定荧光强度记作F3。
以上反应，MB:T:B为10：1：5。
结果发现荧光强度F0<F1<F2≈F3，理论上F3是明显大于F2的，不知为何，检测到的信号强度没有明显提高。目前推测是链B没有将T置换以致F2与F3相近，不知各位大佬有无别的看法，或者具体一些的建议？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2020-11-30 20:14:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小艺ss: 金币+2 2020-12-02 15:24:22
３７°Ｃ足够打开ＭＢ么？　能否加热后退火？
赞一下 回复此楼
行至水穷处，坐看云起时
4楼2020-12-01 21:47:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小艺ss: 金币+5, ★★★很有帮助 2020-12-01 18:29:41
molecular beacon的当量为10，B会优先和游离的过量molecular beacon结合而不会去竞争T，F2就应该约等于F3
赞一下 回复此楼
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2020-12-01 12:19:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小艺ss

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2020-12-01 12:19:31
molecular beacon的当量为10，B会优先和游离的过量molecular beacon结合而不会去竞争T，F2就应该约等于F3

那是否建议尝试一下10：1：10？
赞一下 回复此楼
3楼2020-12-01 18:30:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0854复试调剂 276 +5 wmm9 2026-03-01 7/350 2026-03-03 02:49 by xiadaiyang
[考研] 高分子化学与物理调剂 +6 好好好1233 2026-02-28 16/800 2026-03-03 00:36 by 好好好1233
[考研] 085602化学工程350，调剂，有没有211的 +5 利好利好. 2026-03-02 8/400 2026-03-03 00:30 by deng.z.1314
[考研] 求调剂 +11 yunziaaaaa 2026-03-01 13/650 2026-03-02 21:59 by sunny81
[考研] 272求调剂 +9 材紫有化 2026-02-28 9/450 2026-03-02 20:22 by hypershenger
[考研] 化学，材料，环境类求调剂 +7 考研版棒棒 2026-03-02 7/350 2026-03-02 19:56 by hypershenger
[考研] 261求调剂 +3 陆lh 2026-03-01 3/150 2026-03-02 19:32 by zhukairuo
[考研] 化工270求调剂 +9 什么名字qwq 2026-03-02 9/450 2026-03-02 19:31 by caszguilin
[考研] 268求调剂 +3 好运连绵不绝 2026-03-02 3/150 2026-03-02 19:05 by zhukairuo
[考研] 清华大学 材料与化工 353分求调剂 +4 awaystay 2026-03-02 5/250 2026-03-02 17:33 by yeahyou
[考研] 一志愿华南理工大学材料与化工326分，求调剂 +3 wujinrui1 2026-02-28 3/150 2026-03-02 16:36 by chuocheng
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +6 礼堂丁真258 2026-02-28 9/450 2026-03-02 12:04 by 52hz~~
[考研] 材料学硕318求调剂 +14 February_Feb 2026-03-01 16/800 2026-03-02 11:17 by yuchj
[考研] 一志愿中南大学理学化学 +4 15779376950 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:00 by Fff-1
[考研] 290求调剂 +9 材料专硕调剂； 2026-02-28 11/550 2026-03-01 17:21 by sunny81
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-02-28 7/350 2026-03-01 15:14 by wjLi2017
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +6 Soliloquy_Q 2026-02-28 11/550 2026-03-01 11:14 by 歌liekkas
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业，申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
[考研] 304求调剂 +3 52hz~~ 2026-02-28 5/250 2026-03-01 00:00 by 52hz~~
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭