| 查看: 1106 | 回复: 3 | |||
| 【悬赏金币】回答本帖问题，作者小艺ss将赠送您 23 个金币 | |||
[求助]
预期的链置换信号放大反应没有发生 已有1人参与
|
|||
|
求助各位大佬，本人在做分子信标识别（MB）和信号放大方面的工作，T是靶标核酸链，B是理论上能将与MB结合的T替换下来，游离的T再次与MB反应，以实现T的量放大的效果。具体步骤如下： 1、MB探针溶于缓冲溶液（10mM Tris-HCl，2mM EDTA，5mM MgCl2），95℃加热5min，缓慢冷却至4℃，得到发夹状MB。B直接溶于缓冲溶液备用（10mM Tris-HCl，2mM EDTA）。 2、取MB于PBS溶液中，37℃孵育30min。测定荧光强度记作F0。 3、取MB和T适量于PBS溶液中，37℃孵育30min。测定荧光强度记作F1。 4、取MB和B适量于PBS溶液中，37℃孵育30min。测定荧光强度记作F2。 5、取MB和T适量于PBS溶液中，37℃孵育30min。取出，加入B探针，37℃孵育30min。测定荧光强度记作F3。 以上反应，MB:T:B为10：1：5。 结果发现荧光强度F0<F1<F2≈F3，理论上F3是明显大于F2的，不知为何，检测到的信号强度没有明显提高。目前推测是链B没有将T置换以致F2与F3相近，不知各位大佬有无别的看法，或者具体一些的建议？ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有259人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
fuyuandj86
版主 (著名写手)
己所不欲，勿施于人
- 应助: 397 (硕士)
- 贵宾: 0.015
- 金币: 7576.5
- 散金: 493
- 红花: 60
- 沙发: 2
- 帖子: 1313
- 在线: 1387小时
- 虫号: 544795
- 注册: 2008-04-13
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
- 管辖: 生物科学
2楼2020-12-01 12:19:31
3楼2020-12-01 18:30:06
4楼2020-12-01 21:47:56
40