24小时热门版块排行榜    

查看: 1151  |  回复: 3
【悬赏金币】回答本帖问题,作者星石的将赠送您 100 个金币

星石的

新虫 (正式写手)

[求助] 如何判断小分子化合物阻碍了两个蛋白的结合? 已有1人参与

生物新手,诸多不懂,请多包涵~~

目前已知A(跨膜蛋白)和B(分泌酶)结合,A是B复合物的一部分,A 可以调节B的活性,现在我筛选到一个小分子化合物,体外验证了该化合物能够阻碍A和B的结合,请问下一步该怎么做呢?

1.已知A和B的作用位点是B上的BS1区域,如果最终目的是想要确定该小分子化合物是存在潜在药物活性的小分子,我应该怎么去验证啊?细胞内和小鼠模型中?

2.还需要对A蛋白进行基因敲除确定A上的哪一部分与小分子作用阻止了A与B的结合么?

3.基因敲除和基因突变在功能验证上有什么区别么?

有懂得多的大佬可以帮我全部回答,有只能回答一部分问题的也可以回答,我都会给金币!!!!!

谢谢各位兄弟姐妹的帮助~~在线等,挺急的
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
既然你已经体外验证出来小分子会抑制A-B相互作用了,体内实验就不用纠结这一点了。
接下来可以验证小分子会影响A-B相互结合所导致的下游信号通路或基因表达的变化。在敲除A或B的细胞里,小分子不会影响这些下游信号通路或基因表达,进而证明小分子是依赖于A或B发挥作用的。
另外如果一个小分子可以抑制A和B的相互作用,大多数情况是不会既和A结合也和B结合的。你可以进一步研究小分子是和A结合,还是和B结合。
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2020-11-18 13:13:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

星石的

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2020-11-18 13:13:14
既然你已经体外验证出来小分子会抑制A-B相互作用了,体内实验就不用纠结这一点了。
接下来可以验证小分子会影响A-B相互结合所导致的下游信号通路或基因表达的变化。在敲除A或B的细胞里,小分子不会影响这些下游信号 ...

非常感谢,因为A和B的结合作用文献中已经有报道,A调节B的活性引起B去剪切某个蛋白产生活性,那么下游信号通路或者基因表达变化还需要验证么?
3楼2020-11-18 13:25:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

引用回帖:
3楼: Originally posted by 星石的 at 2020-11-18 13:25:35
非常感谢,因为A和B的结合作用文献中已经有报道,A调节B的活性引起B去剪切某个蛋白产生活性,那么下游信号通路或者基因表达变化还需要验证么?...

"A调节B的活性引起B去剪切某个蛋白产生活性":那你就看看加了小分子以后,蛋白的剪切是不是被抑制了。剪切激活了某一种蛋白也必然带来下游通路的变化,剪切被抑制了就逆转了这一变化。
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
4楼2020-11-18 14:48:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 星石的 的主题更新
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 285求调剂 +3 ytter 2026-03-22 3/150 2026-03-22 10:48 by 30660438
[考研] 311求调剂 +13 冬十三 2026-03-15 14/700 2026-03-21 22:10 by peike
[考研] 297求调剂 +3 喜欢还是不甘心 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:33 by 学员8dgXkO
[考研] 工科0856求调剂 +3 沐析汀汀 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:30 by 学员8dgXkO
[考研] 268求调剂 +9 简单点0 2026-03-17 9/450 2026-03-21 15:37 by lature00
[考研] 265求调剂 +12 梁梁校校 2026-03-19 14/700 2026-03-21 13:38 by lature00
[考研] 22 350 本科985求调剂,求老登收留 +3 李轶男003 2026-03-20 3/150 2026-03-21 13:28 by 搏击518
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 阿姐阿姐家啊 2026-03-18 3/150 2026-03-20 23:24 by JourneyLucky
[考研] 350求调剂 +5 weudhdk 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:04 by luoyongfeng
[考研] 一志愿西南交通 专硕 材料355 本科双非 求调剂 +5 西南交通专材355 2026-03-19 5/250 2026-03-20 21:10 by JourneyLucky
[考研] 260求调剂 +3 朱芷琳 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:35 by 学员8dgXkO
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
[考研] 085601材料工程专硕求调剂 +10 慕寒mio 2026-03-16 10/500 2026-03-19 15:26 by 丁丁*
[考研] 材料与化工求调剂 +7 为学666 2026-03-16 7/350 2026-03-19 14:48 by 尽舜尧1
[考研] 085600材料与化工求调剂 +6 绪幸与子 2026-03-17 6/300 2026-03-19 13:27 by houyaoxu
[考研] 【同济软件】软件(085405)考研求调剂 +3 2026eternal 2026-03-18 3/150 2026-03-18 19:09 by 搏击518
[考研] 材料,纺织,生物(0856、0710),化学招生啦 +3 Eember. 2026-03-17 9/450 2026-03-18 10:28 by Eember.
[考博] 26申博 +4 八6八68 2026-03-16 4/200 2026-03-17 13:00 by 轻松不少随
[考研] 一志愿南京大学,080500材料科学与工程,调剂 +4 Jy? 2026-03-16 4/200 2026-03-17 11:02 by gaoqiong
信息提示
请填处理意见