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yuanhuishuai

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 41
帖子: 6
在线: 2.2小时
虫号: 3840951
注册: 2015-04-29
专业: 微生物遗传育种学

[求助] 酶切效率低，求助已有2人参与

NEB的BpuEI酶，1ul酶切不开1ug的质粒，多加酶也没用，求大神指导

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1楼 2020-10-29 16:19:37

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

agricultural

新虫 (正式写手)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 550.2
散金: 684
红花: 1
帖子: 345
在线: 43.2小时
虫号: 3364412
注册: 2014-08-13
性别: GG
专业: 作物分子育种

会不会是酶切位点不对，如何判断酶没有切开质粒的呢

发自小木虫Android客户端

8楼2020-11-14 20:10:24

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 8 个回答

smyoung

新虫 (小有名气)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 298.9
散金: 90
红花: 1
帖子: 211
在线: 69.9小时
虫号: 1299386
注册: 2011-05-18
性别: MM
专业: 细胞死亡

看看温度对不对

发自小木虫IOS客户端

2楼2020-10-29 18:13:58

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

sunny0810

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 15
帖子: 9
在线: 3.4小时
虫号: 23271898
注册: 2020-07-27
性别: MM
专业: 农业昆虫学

【答案】应助回帖

可以增加一下酶切时间试试，NEB的内切酶建议的酶切时间是37°C，30 min，但我们往往会选择酶切1h，如果实在很难切开的话，可以延长至4 h或过夜

3楼2020-11-03 21:59:36

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

junjieshao

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

4楼2020-11-05 00:43:18

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 8 个回答

不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)

普通表情龙兔虎猫

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