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1楼2020-10-29 16:19:37

smyoung

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看看温度对不对

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2楼2020-10-29 18:13:58

sunny0810

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【答案】应助回帖

可以增加一下酶切时间试试，NEB的内切酶建议的酶切时间是37°C，30 min，但我们往往会选择酶切1h，如果实在很难切开的话，可以延长至4 h或过夜

3楼2020-11-03 21:59:36

junjieshao

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4楼2020-11-05 00:43:18

yuanhuishuai

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2楼: Originally posted by smyoung at 2020-10-29 18:13:58
看看温度对不对

37℃没问题

5楼2020-11-05 13:07:04

yuanhuishuai

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4楼: Originally posted by junjieshao at 2020-11-05 00:43:18
质粒质量如何，是midi的？

A260/A280,A260/A230两个比值正常，难道是残留杂质影响

6楼2020-11-05 13:11:42

yuanhuishuai

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3楼: Originally posted by sunny0810 at 2020-11-03 21:59:36
可以增加一下酶切时间试试，NEB的内切酶建议的酶切时间是37°C，30 min，但我们往往会选择酶切1h，如果实在很难切开的话，可以延长至4 h或过夜

谢谢，都已试效果一般

7楼2020-11-05 13:15:33

agricultural

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会不会是酶切位点不对，如何判断酶没有切开质粒的呢

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8楼2020-11-14 20:10:24