应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 酶切效率低，求助
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
81/1返回列表
查看: 2168  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者yuanhuishuai将赠送您 5 个金币

yuanhuishuai

新虫 (初入文坛)

[求助] 酶切效率低，求助 已有2人参与

NEB的BpuEI酶，1ul酶切不开1ug的质粒，多加酶也没用，求大神指导
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2020-10-29 16:19:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smyoung

新虫 (小有名气)
看看温度对不对

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
2楼2020-10-29 18:13:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunny0810

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可以增加一下酶切时间试试，NEB的内切酶建议的酶切时间是37°C，30 min，但我们往往会选择酶切1h，如果实在很难切开的话，可以延长至4 h或过夜
赞一下 回复此楼
3楼2020-11-03 21:59:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

junjieshao

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
4楼2020-11-05 00:43:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanhuishuai

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by smyoung at 2020-10-29 18:13:58
看看温度对不对

37℃没问题
回复此楼
5楼2020-11-05 13:07:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanhuishuai

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by junjieshao at 2020-11-05 00:43:18
质粒质量如何，是midi的？

A260/A280,A260/A230两个比值正常，难道是残留杂质影响
赞一下 回复此楼
6楼2020-11-05 13:11:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanhuishuai

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by sunny0810 at 2020-11-03 21:59:36
可以增加一下酶切时间试试，NEB的内切酶建议的酶切时间是37°C，30 min，但我们往往会选择酶切1h，如果实在很难切开的话，可以延长至4 h或过夜

谢谢，都已试效果一般
赞一下 回复此楼
7楼2020-11-05 13:15:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

agricultural

新虫 (正式写手)
会不会是酶切位点不对，如何判断酶没有切开质粒的呢

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2020-11-14 20:10:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yuanhuishuai 的主题更新
81/1返回列表
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿太原理工安全工程300分，求调剂 +3 0857求调剂. 2026-03-24 3/150 2026-03-27 01:18 by 求知若渴lz
[考研] 305求调剂 +4 哇卢卡库 2026-03-26 4/200 2026-03-26 20:58 by sanrepian
[考研] 0703化学求调剂 +3 丹青奶盖 2026-03-26 5/250 2026-03-26 20:11 by macy2011
[考研] 334分 一志愿武理 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-26 4/200 2026-03-26 16:00 by 不吃魚的貓
[考研] 281求调剂 +6 Koxui 2026-03-24 7/350 2026-03-26 15:37 by 无际的草原
[考研] 一志愿陕师大生物学071000，298分，求调剂 +4 SYA！ 2026-03-23 4/200 2026-03-26 15:27 by caiaijun80
[考研] 材料277求调剂 +5 min3 2026-03-24 5/250 2026-03-26 15:13 by zzll406
[考研] 296求调剂 +5 www_q 2026-03-20 5/250 2026-03-26 12:56 by 3Strings
[考研] 311求调剂 +4 勇敢的小吴 2026-03-20 4/200 2026-03-25 18:12 by xcjcqu
[考研] 302求调剂 +4 锦衣卫藤椒 2026-03-25 4/200 2026-03-25 16:29 by 功夫疯狂
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-24 3/150 2026-03-24 21:31 by peike
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 材料292调剂 +8 橘颂思美人 2026-03-23 8/400 2026-03-24 16:33 by laoshidan
[考研] 284求调剂 +3 yanzhixue111 2026-03-23 6/300 2026-03-23 22:58 by pswait
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
[考研] 工科0856求调剂 +5 沐析汀汀 2026-03-21 5/250 2026-03-23 17:56 by 海瑟薇-
[考研] 276求调剂 +3 YNRYG 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:31 by 醉在风里
[考研] 一志愿东华大学化学070300，求调剂 +7 2117205181 2026-03-21 8/400 2026-03-22 22:55 by chixmc
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
[考研] 319求调剂 +4 小力气珂珂 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:53 by ColorlessPI
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭