应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 酶切效率低，求助
81/1返回列表
查看: 2118  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者yuanhuishuai将赠送您 5 个金币

yuanhuishuai

新虫 (初入文坛)

[求助] 酶切效率低，求助 已有2人参与

NEB的BpuEI酶，1ul酶切不开1ug的质粒，多加酶也没用，求大神指导
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2020-10-29 16:19:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smyoung

新虫 (小有名气)
看看温度对不对

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
2楼2020-10-29 18:13:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunny0810

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可以增加一下酶切时间试试，NEB的内切酶建议的酶切时间是37°C，30 min，但我们往往会选择酶切1h，如果实在很难切开的话，可以延长至4 h或过夜
赞一下 回复此楼
3楼2020-11-03 21:59:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

junjieshao

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
4楼2020-11-05 00:43:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanhuishuai

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by smyoung at 2020-10-29 18:13:58
看看温度对不对

37℃没问题
回复此楼
5楼2020-11-05 13:07:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanhuishuai

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by junjieshao at 2020-11-05 00:43:18
质粒质量如何，是midi的？

A260/A280,A260/A230两个比值正常，难道是残留杂质影响
赞一下 回复此楼
6楼2020-11-05 13:11:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuanhuishuai

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by sunny0810 at 2020-11-03 21:59:36
可以增加一下酶切时间试试，NEB的内切酶建议的酶切时间是37°C，30 min，但我们往往会选择酶切1h，如果实在很难切开的话，可以延长至4 h或过夜

谢谢，都已试效果一般
赞一下 回复此楼
7楼2020-11-05 13:15:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

agricultural

新虫 (正式写手)
会不会是酶切位点不对，如何判断酶没有切开质粒的呢

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2020-11-14 20:10:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yuanhuishuai 的主题更新
81/1返回列表
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 欢迎采矿、地质、岩土、计算机、人工智能等专业的同学报考 +8 pin8023 2026-02-28 11/550 2026-03-04 00:12 by 不吃鱼肉
[考研] 266材料化工求调剂 +3 哇塞王帅 2026-03-03 3/150 2026-03-03 17:58 by houyaoxu
[考研] 0805总分292，求调剂 +12 幻想之殇 2026-03-01 12/600 2026-03-03 15:58 by tgxtgxtgx9
[考研] 268求调剂 +10 简单点0 2026-03-02 14/700 2026-03-03 14:51 by pingping55
[考研] 一志愿中科大能动297求调剂，本科川大 +3 邵11 2026-03-03 3/150 2026-03-03 14:50 by 新能源达人
[考研] 求调剂 +4 Guo_yuxuan 2026-03-02 5/250 2026-03-03 14:39 by xiaomc_gzh
[考研] 材料学硕318求调剂 +11 February_Feb 2026-03-01 11/550 2026-03-03 14:24 by NUAAZXWS
[考研] 268求调剂 +6 好运连绵不绝 2026-03-02 6/300 2026-03-03 13:03 by 秋收
[考研] 299求调剂 +5 kkcoco25 2026-03-02 9/450 2026-03-03 12:55 by 公瑾逍遥
[考研] 化学0703求调剂 学硕 理/工科均可 总分279 +3 1一11 2026-03-03 5/250 2026-03-03 12:37 by 1一11
[考研] 没上岸的看过来 +3 tangxiaotian 2026-03-01 3/150 2026-03-03 12:03 by emokidd
[考研] 高分子化学与物理调剂 +6 好好好1233 2026-02-28 16/800 2026-03-03 00:36 by 好好好1233
[考研] 0856材料与化工，270求调剂 +11 YXCT 2026-03-01 13/650 2026-03-02 21:38 by sunny81
[考博] 26超级电容器申博 +3 dhdjdjend 2026-02-25 3/150 2026-03-02 19:21 by 轻松不少随
[考研] 291 求调剂 +3 化工2026届毕业� 2026-03-02 3/150 2026-03-02 12:55 by houyaoxu
[考研] 292求调剂 +7 yhk_819 2026-02-28 7/350 2026-03-02 12:43 by 无际的草原
[考研] 求调剂 +3 熬夜的猫头鹰 2026-03-02 3/150 2026-03-02 11:45 by 刘兵
[考研] 一志愿中南大学理学化学 +4 15779376950 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:00 by Fff-1
[考研] 313求调剂 +3 水流年lc 2026-02-28 3/150 2026-03-01 16:01 by 新能源达人
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +6 Soliloquy_Q 2026-02-28 11/550 2026-03-01 11:14 by 歌liekkas
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭