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酶切问题求助
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最近EcoRI和XhoI双酶切已连接到T载体上的目的片段（目的片段大小为400bp左右），酶切体系为50微升，如下： buffer：5微升， EcoRI:2微升 XhoI：2微升 质粒：21微升 水：20微升 之前做过该体系的双酶切，电泳验证均没有问题，但是这两天重复做的时候，却怎么也得不到我的目的片段。。。 说明下，前些天是做该目的片段的回收（50微升），但一直没有回收成功，于是想加大体系（100微升），便分两管50微升双酶切，可是双酶切却出现了问题。。现在不知道怎么办才好。。。希望大家给点建议。。我都重复的有点绝望了。。。。 |
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