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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 酶切问题求助
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雨后郁金香

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+5,VIP+0):支持上图！ 7-21 22:21
引用回帖:
Originally posted by smurfen at 2009-7-21 17:24:
楼主发一下酶切后的电泳图哦

是没有目的片段还是载体的那条大片段也没切出来？

要是有载体的话可能是TA克隆没有做好呢

把图片上传来，但是之前一样的体系作成功过啊，只是回收时没有回收回来。。。
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11楼2009-07-21 22:11:39
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雨后郁金香

金虫 (小有名气)
说明：上图从左至右依次为：带有偶目的片段的T载体的双酶切（前三个电泳孔）、200bp marker，带有偶目的片段的T载体，超螺旋marker。。。。
  备注，由于当天电泳问题，超螺旋marker跑的很丑。。大体就是这样的。。。
  多谢各位虫友的分析。。。。
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12楼2009-07-21 22:16:50
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spring0304

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
用的是同一管质粒DNA吗？如果不是，可以把反应体系中的质粒dna的量加大一点试试看.
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13楼2009-07-22 18:38:32
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ly888lsp

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可能是你的质粒的质量不好，影响酶切。
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14楼2009-07-22 20:24:46
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zplipeng

金虫 (著名写手)
学习到很多东西
祝福。》》
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加油哦↖(^ω^)↗，O(∩_∩)O哈哈~
15楼2009-07-22 20:33:56
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smallcat227

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 雨后郁金香 at 2009-7-21 22:11:



把图片上传来，但是之前一样的体系作成功过啊，只是回收时没有回收回来。。。

双酶切未成功的电泳图没有上传，还是就是第5道的？
质粒前面有杂质，可能影响了酶切反应，
可以考虑更换新的酶液试试
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16楼2009-07-22 20:40:01
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