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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告

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抽象派单纯

新虫 (初入文坛)

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[交流] 有什么办法和酶可以防止dUTP扩增，而仅扩增dNTP 已有3人参与

最近想做一个筛选。

想问下大家，有没有什么办法或者酶可以比较高特异性的识别T碱基和U碱基，当体系中原料是dNTP时可以正常扩增，而换成dUTP时则无法扩增，当然，反过来也可以，谢谢！

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1楼 2020-09-13 21:28:42

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山舞银蛇

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4楼: Originally posted by 抽象派单纯 at 2020-09-14 12:44:57
请问PFU酶可以放到扩增体系里吗？比如我做普通的PCR或者恒温扩增，如果放入pfu酶，是不是就无法扩增dUTP为原料的体系？如果是正常的dNTP体系就仍然可以扩增？...

你用Taq、Tth、Pfu、KOD这些酶做出来的才叫PCR，

既然用pfu，又怎么会能做恒温扩增呢

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核酸提取与Taqman诊断

6楼2020-09-17 08:52:00

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pennchem

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加入 UNG酶就可以了，根据你反应温度，加入耐热或不耐热的酶

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行至水穷处，坐看云起时

2楼2020-09-14 08:05:25

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山舞银蛇

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2楼: originally posted by pennchem at 2020-09-14 08:05:25
加入 ung酶就可以了，根据你反应温度，加入耐热或不耐热的酶

我估计你理解错题主的意思了。他应该不是想消化掉模板里的dutp。其实这问题很简单，使用pfu这类酶，是不能把溶液中的dutp掺入产物的。

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核酸提取与Taqman诊断

3楼2020-09-14 10:14:50

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抽象派单纯

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3楼: Originally posted by 山舞银蛇 at 2020-09-14 10:14:50
我估计你理解错题主的意思了。他应该不是想消化掉模板里的dutp。其实这问题很简单，使用pfu这类酶，是不能把溶液中的dutp掺入产物的。...

请问PFU酶可以放到扩增体系里吗？比如我做普通的PCR或者恒温扩增，如果放入pfu酶，是不是就无法扩增dUTP为原料的体系？如果是正常的dNTP体系就仍然可以扩增？

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4楼2020-09-14 12:44:57

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